Молочный агар с цетримидом HiMedia M1273-500G (уп/500 гр)

Питательная агаризованная среда Молочный агар с цетримидом HiMedia M1273-500G (уп/500 гр) — двухкомпонентный порошковый набор для приготовления селективной среды. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в воде, включая хлорированную питьевую воду, воду бассейнов, термальных источников и солёную воду.

Назначение

Молочный агар с цетримидом применяется для выделения, подтверждения и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в образцах воды. Среда предназначена для анализа хлорированной питьевой воды, воды плавательных бассейнов, термальных источников и солёной воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,4 г части B в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте часть B в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 20 мин.
4. Суспендируйте 133,33 г части A в 750 мл очищенной или дистиллированной воды.
5. Стерилизуйте часть A в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 5 мин.
6. Охладите обе части до 45–50 °C.
7. Смешайте части A и B.
8. Разлейте готовую среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный селективный агар с цетримидом разработан Brown и Scott для подтверждения наличия Pseudomonas aeruginosa в воде плавательных бассейнов. Вода бассейнов обычно представляет собой хлорированную питьевую воду, однако может поступать из термальных источников или быть солёной.

Микроорганизмы, представляющие интерес при таком контроле, обычно происходят с тела купающихся, включая области естественных отверстий. Pseudomonas aeruginosa способна дольше сохраняться в воде по сравнению с другими микроорганизмами и поэтому относится к основным индикаторным организмам для воды плавательных бассейнов. Бактерия может вызывать инфекции уха и глаза и легко распространяться в воде бассейна из-за постоянного контакта ушей и глаз с водой.

Среда сформулирована в соответствии со спецификациями комитета ISO ISO 8360-1:1988 для обнаружения и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в воде.

Штаммы Pseudomonas aeruginosa идентифицируют по образованию пигмента — пиоцианина. Pseudomonas aeruginosa является единственным видом рода Pseudomonas или известной грамотрицательной палочкой, выделяющей пиоцианин.

Pseudomonas aeruginosa гидролизует казеин и образует на модифицированном селективном агаре с цетримидом диффузный пигмент от желтоватого до зелёного цвета. Порошок SM, пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизм необходимыми питательными веществами, главным образом азотистыми, для размножения. На среде Pseudomonas aeruginosa образует желтовато-зелёные колонии.

Цетримид действует как четвертичное аммониевое соединение и катионное моющее вещество, вызывающее высвобождение азота и фосфора из бактериальных клеток, отличных от Pseudomonas aeruginosa.

Методика выделения и подтверждения

1. Профильтруйте через стерильные мембранные фильтры 200 мл или меньший объём воды плавательного бассейна.
2. Поместите каждый мембранный фильтр на агар M-PA (M1121).
3. Инкубируйте чашки при температуре 41,5 ± 0,5 °C в течение 72 ч.
4. Отберите типичные колонии Pseudomonas aeruginosa. Диаметр колоний составляет 0,8–2,2 мм; колонии плоские, с коричневатыми или зеленоватыми центрами.
5. Для подтверждения выполните один штриховой посев изолированной колонии на чашку с модифицированным селективным агаром с цетримидом.
6. Инкубируйте чашку при температуре 35–37 °C в течение 24 ч.
7. После инкубации Pseudomonas aeruginosa образует пигментированные колонии.

Тип образцов

• Хлорированная питьевая вода.
• Вода плавательных бассейнов.
• Вода термальных источников.
• Солёная вода.

Отбор и обращение с образцами

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Гель плотный, сопоставимый с гелем 2,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией.

Реакция

Реакция водного раствора части B с концентрацией 2,64 % масс./об. при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв контейнер, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом