Основа модифицированного селективного агара для выделения кампилобактерий HiMedia M1268-500G (уп/500 гр)

Основа модифицированного селективного агара для выделения кампилобактерий HiMedia M1268-500G (уп/500 гр) — порошковая питательная среда для приготовления селективных сред на основе агара Бруцелла с добавлением селективных добавок. Основа применяется для селективного выделения и культивирования термотолерантных видов Campylobacter, при этом инкубацию посевов проводят при 42 °C в микроаэробной атмосфере.

Назначение

Основа модифицированного агара Бруцелла используется как базовая среда для приготовления:

• среды Campylobacter BAP с добавлением добавки Campylobacter Supplement I (Blaser Wang) FD006 и дефибринированной овечьей крови;
• агара Блазера;
• среды Кампилобактер Бутцлера с добавлением добавки Campylobacter Supplement II (Butzler) FD007 и дефибринированной овечьей крови.

Среда предназначена для селективного выделения и культивирования термотолерантных видов Campylobacter, включая Campylobacter jejuni и Campylobacter coli.

Свидетельство о государственной регистрации: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами среды.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный агар Бруцелла сформулирован согласно методике APHA для выделения и культивирования видов Campylobacter. Селективность среды обеспечивается антибиотиками, подавляющими сопутствующую кишечную микрофлору.

В качестве основы модифицированный агар Бруцелла применяется для приготовления среды Campylobacter BAP, агара Блазера и среды Кампилобактер Бутцлера. Для выделения C. jejuni в состав среды Блазера могут вводиться четыре антибиотика: амфотерицин B, полимиксин B, триметоприм и ванкомицин.

• Ванкомицин — гликопептидный антибиотик, подавляющий многие виды грамположительных бактерий.
• Амфотерицин B — противогрибковое средство.
• Цефалотин добавляется для подавления непатогенных видов Campylobacter fetus.
• В состав варианта Бутцлера вводятся цефоперазон, рифампицин, колистин и амфотерицин B.

Казеиновый ферментативный гидролизат и пептический перевар тканей животного происхождения обеспечивают среду питательными веществами, включая азотистые соединения, серу, углерод и микроэлементы. Глюкоза служит источником энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Различные антибиотики обеспечивают селективность среды.

Campylobacter jejuni является термофильным микроорганизмом, поэтому чашки важно инкубировать при 42 °C; отклонение от этой температуры приводит к замедлению роста. Повышенная температура также усиливает селективность, подавляя нормальную микрофлору.

После разливки среды в чашки Петри не следует подвергать её чрезмерному воздействию света. Перед нанесением посевного материала поверхность агара необходимо подсушить для ограничения избытка влаги.

Campylobacter jejuni формирует два типа колоний:

• мелкие, выпуклые, серовато-коричневые, гладкие и блестящие колонии с цельным полупрозрачным краем;
• плоские, слизистые, полупрозрачные, сероватые колонии с неровным краем.

Приготовление среды

1. Для приготовления среды с последующим добавлением FD006 суспендируйте 45 г порошка в 890 мл дистиллированной воды.
2. Для приготовления среды с последующим использованием FD007 суспендируйте 45 г порошка в 940 мл дистиллированной воды.
3. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите основу до 45–50 °C.

Приготовление среды Campylobacter BAP

1. Добавьте к базовой среде регидратированное содержимое 2 флаконов добавки Campylobacter Supplement I (Blaser Wang) FD006.
2. Добавьте 100 мл дефибринированной овечьей крови в объемном соотношении.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Приготовление среды Кампилобактер Бутцлера

1. Добавьте к базовой среде регидратированное содержимое 2 флаконов добавки Campylobacter Supplement II (Butzler) FD007.
2. Добавьте 50 мл дефибринированной овечьей крови в объемном соотношении.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• После добавления крови: непрозрачный гель в чашках Петри вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 42 °C в течение 48 ч в микроаэробной атмосфере, содержащей 5 % O₂, 10 % CO₂ и 85 % N₂.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.