Основа агара с цефексимом для кампилобактерий HiMedia M1267-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа агара с цефексимом для кампилобактерий HiMedia M1267-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для селективного выделения и культивирования видов Campylobacter. Применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов; для приготовления среды требуется добавление дефибринированной крови и селективной добавки Park and Sanders II (FD105).

Назначение

Основа агара предназначена для выделения и культивирования видов Campylobacter. Среда используется при исследовании:

• клинических образцов — фекалий;
• пищевых и молочных образцов;
• образцов воды.

Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Содержание компонентов указано в г/л.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 49,35 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов:
   • 10 % дефибринированной крови овцы;
   • 5–7 % об./об. лизированной крови лошади.
6. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Park and Sanders II (FD105).
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Виды Campylobacter связаны с различными ветеринарными заболеваниями и являются бактериальными возбудителями пищевых гастроэнтеритов у человека. Передача микроорганизмов также возможна через загрязнённые пищевые продукты или воду.

Основа агара Campylobacter Cefex используется для выделения и культивирования видов Campylobacter. Агар Campylobacter с противомикробными компонентами и 50 мл крови овцы рекомендован в качестве селективной среды для первичного выделения и культивирования видов Campylobacter.

Основа агара Campylobacter Cefex обеспечивает питательную базу среды. Добавление крови лошади обогащает среду фактором X и другими факторами, необходимыми для роста микроорганизмов. Триптон, пептон и дрожжевой экстракт являются источниками азотистых соединений, углерода, серы, витаминов и микроэлементов. Глюкоза используется как источник энергии. Кровь овцы обеспечивает фактор X (гем) и другие компоненты, необходимые для роста.

Введение антибиотиков из добавки FD105 подавляет рост нормальной микрофлоры в образцах и облегчает выделение видов Campylobacter. Добавление противомикробных компонентов необходимо для подавления нормальной микрофлоры:

• цефоперазон подавляет рост многих грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, включая аэробные и анаэробные виды;
• циклогексимид подавляет рост контаминирующих грибов.

Среда может использоваться для прямого или непрямого посева. После посева чашки инкубируют при 42 °C в течение 48–72 ч в микроаэрофильной атмосфере. Дополнительно среду можно готовить в двух экземплярах: второй комплект инкубируют при 35–37 °C для обеспечения роста некоторых видов Campylobacter.

Морфология колоний Campylobacter jejuni

Через 24–48 ч колонии Campylobacter jejuni могут иметь следующие признаки:

• небольшие слизистые плоские сероватые колонии с неровными краями, без гемолитических зон;
• круглые, выпуклые, с цельным краем, блестящие колонии диаметром 1–2 мм;
• розоватые или желтовато-серые колонии; у некоторых колоний возможно образование «хвоста» вдоль линии штриха.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Некоторые компоненты селективной среды могут подавлять рост отдельных штаммов целевых видов.
2. Чувствительные к цефалотину виды Campylobacter, такие как C. fetus и C. upsaliensis, могут не выделяться на основе агара Campylobacter Cefex из-за присутствия цефоперазона.
3. Образцы, высеянные на селективную среду, необходимо также культивировать на неселективной среде для получения дополнительной информации и обеспечения выделения потенциальных патогенов.
4. Селективные компоненты могут подавлять некоторые штаммы целевых видов, поэтому применение только селективной среды не гарантирует восстановление всех потенциально присутствующих микроорганизмов.

Условия биологической безопасности

Среда предназначена для диагностики in vitro и только для профессионального применения.

При работе с контейнером, образцами и культурами необходимо:

• ознакомиться с маркировкой перед вскрытием контейнера;
• использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами;
• соблюдать стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами;
• обращаться к индивидуальным паспортам безопасности при необходимости уточнения требований безопасности.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды:

• базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель;
• после добавления крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 4,94 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в микроаэрофильной атмосфере с добавлением 10 % об./об. дефибринированной крови овцы или 5–7 % об./об. лизированной крови лошади и селективной добавки Park and Sanders II (FD105) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Хранение сухого порошка: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.

Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Порошок гигроскопичен; при неправильном хранении возможно образование комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и