Основа среды для определения чувствительности H.influenzae HiMedia M1259-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа питательной среды «Основа среды для определения чувствительности H.influenzae HiMedia M1259-500G (уп/500 гр)» — сухой порошкообразный препарат для приготовления агаровой среды. Применяется для определения чувствительности Haemophilus influenzae к противомикробным препаратам методом дисковой диффузии или разведения; перед использованием требует добавления восстановленного геминового ростового супплемента FD117.

Назначение

Основа среды предназначена для определения чувствительности выделенных из клинических образцов микроорганизмов Haemophilus influenzae к антибиотикам и другим противомикробным средствам.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Вид исследуемого материала: выделенный микроорганизм из клинических образцов
• Форма выпуска: порошок
• Упаковка: флакон из ПЭВП (полиэтилена высокой плотности), 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Происхождение сырья: животное

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

* Эквивалент мясного настоя.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Виды Haemophilus являются требовательными к питательным условиям роста и нуждаются в экзогенном гемине, или факторе X, и/или НАД, или факторе V. По этой причине агар Мюллера—Хинтона, применяемый для определения чувствительности бактерий к противомикробным препаратам, не подходит для определения чувствительности Haemophilus.

Добавление крови в агар Мюллера—Хинтона для обеспечения необходимых питательных факторов делает среду непрозрачной, что препятствует проведению анализа чувствительности.

Основа агара для тестирования Haemophilus, разработанная для определения чувствительности Haemophilus influenzae, имеет состав, сходный с агаром Мюллера—Хинтона, с добавлением дрожжевого экстракта и ростовых добавок. Прозрачность среды позволяет визуально оценивать зоны задержки роста. Низкое содержание нуклеотида тимидина допускает проведение тестирования триметоприма/сульфаметоксазола.

Настой HM B и Acicaserm обеспечивают микроорганизмы азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и необходимыми питательными веществами. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде.

Поверхность основы с добавленными питательными веществами инокулируют тампоном или распределением суспензии. На поверхность среды помещают диски из бумаги, пропитанные определённым количеством антибиотика или другого противомикробного средства, с соблюдением расстояния между дисками. Чашки инкубируют в атмосфере с CO₂, после чего измеряют зоны задержки роста вокруг дисков. Сопоставление размеров зон с критериями NCCLS позволяет определить чувствительность микроорганизма: чувствительный, устойчивый или промежуточный ответ на противомикробное средство.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 21,5 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа, 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона геминового ростового супплемента FD117.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Проведение тестирования

1. Инокулируйте поверхность приготовленной среды с добавленным геминовым ростовым супплементом тампоном или распределением микробной суспензии.
2. Разместите на поверхности среды бумажные диски, пропитанные определённым количеством антибиотика или другого противомикробного средства, с правильным расстоянием между дисками.
3. Инкубируйте чашки в инкубаторе с CO₂.
4. После инкубации измерьте зоны задержки роста вокруг каждого диска.
5. Сопоставьте размеры зон с критериями NCCLS и определите, является ли микроорганизм чувствительным, устойчивым или промежуточным по отношению к исследуемому противомикробному средству.

Тип образца

Для анализа используют выделенный микроорганизм из клинических образцов.

Условия инкубации и ограничения

• Концентрация CO₂: 5–7 %
• Температура инкубации: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч
• Ограничение: неправильная концентрация инокулюма может привести к недостоверным результатам.
• Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении согласно инструкции на этикетке, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор с концентрацией 4,3 % масс./об. при 25 °C
• pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления геминового ростового супплемента FD117 и инкубации в атмосфере с содержанием CO₂ 5–7 % при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом месте.
• Порошок обладает гигроскопичностью; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• После каждого использования контейнер следует герметично закрывать.
• Среду следует использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального использования.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одеж