Основа селективного агара для выделения S.agalactiae HiMedia M1257-500G (уп/500 гр)
Питательная среда «Основа селективного агара для выделения S.agalactiae HiMedia M1257-500G (уп/500 гр)» — основа селективного агара для выделения Streptococcus agalactiae из молочных продуктов. Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации S. agalactiae; готовую среду нельзя автоклавировать, перед разливом в неё добавляют дефибринированную кровь и β-токсин Staphylococcus.
Описание
Питательная среда «Основа селективного агара для выделения S.agalactiae HiMedia M1257-500G (уп/500 гр)» — основа селективного агара для выделения Streptococcus agalactiae из молочных продуктов. Среда предназначена для селективного выделения и дифференциации S. agalactiae; готовую среду нельзя автоклавировать, перед разливом в неё добавляют дефибринированную кровь и β-токсин Staphylococcus.
Назначение и область применения
- Тип питательной среды: диагностическая
- Назначение изделия: основа селективного агара
- Рекомендуемое применение: селективное выделение Streptococcus agalactiae из молочных продуктов
- Тип образца: молочные образцы
- Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Состав
Формула среды приведена для 1 л; состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных параметров эффективности.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон | 10,000 |
| Экстракт HM# | 5,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Эскулин | 1,000 |
| Сульфат таллия | 0,333 |
| Кристаллический фиолетовый | 0,0013 |
| Агар | 13,000 |
Экстракт HM# эквивалентен мясному экстракту.
- Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
Методика приготовления среды
- Взвесьте 34,34 г сухой среды и суспендируйте в 940 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
- Не автоклавируйте среду.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- Добавьте 60 мл дефибринированной крови и 25 мл β-токсина Staphylococcus.
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте приготовленную среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Streptococcus agalactiae — грамположительный стрептококк, характеризующийся наличием антигена группы B по Лэнсфилду. S. agalactiae проявляет β-гемолитическую реакцию. На чашке с кровяным агаром микроорганизм образует зоны гемолиза, которые немного превышают размер сформированных колоний.
Стрептококки группы B гидролизуют гиппурат натрия и дают положительную реакцию в CAMP-тесте. S. agalactiae также чувствителен к желчи и лизируется в её присутствии.
Селективный агар для Streptococcus agalactiae разработан Hauge и Kohler-Ellingsen для выделения S. agalactiae, возбудителя мастита крупного рогатого скота. Дифференциацию между видами Streptococcus проводят по гидролизу эскулина, который проявляется тёмно-коричневым окрашиванием вследствие образования комплекса эскулин—таллий.
Сульфат таллия и кристаллический фиолетовый подавляют сопутствующую бактериальную флору. β-токсин Staphylococcus воздействует на эритроциты в среде таким образом, что они могут подвергаться полному гемолизу. S. agalactiae не проявляет гемолиз на простом кровяном агаре, поэтому S. agalactiae можно отличить от облигатных негемолизирующих колоний.
Пептон и экстракт HM служат источниками азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ.
S. agalactiae образует гладкие колонии голубовато-синего цвета, окружённые зонами гемолиза. Дальнейшую идентификацию проводят биохимическими и серологическими методами, прежде всего с использованием CAMP-теста.
Контроль качества
Внешний вид
Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
Основная среда образует прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета. После добавления крови в чашках Петри образуется опалесцирующий гель красного цвета.
Реакция
- Условия определения: водный раствор с концентрацией 3,43 % м/о при 25 °C
- pH: 7,4 ± 0,2
Диапазон pH
- pH: 7,20–7,60
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Синяя колония | Гемолиз |
|---|---|---|---|---|---|
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | вариабельная реакция | альфа |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | ||
| Streptococcus agalactiae ATCC 13813 | 50–100 | обильный | ≥50 % | положительная реакция | бета |
| Streptococcus agalactiae ATCC 27956 | 50–100 | обильный | ≥50 % | положительная реакция | бета |
| Streptococcus cremoris ATCC 19257 | 50–100 | обильный | ≥50 % | вариабельная реакция | альфа |
| Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 | 50–100 | обильный | ≥50 % | отрицательная реакция | альфа |
| Streptococcus pyogenes ATCCC 19615 | 50–100 | обильный | ≥50 % | отрицательная реакция | бета |
| Streptococcus lactis ATCC 19435 (00016*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Пробоотбор и обращение с образцами
Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Меры предосторожности
- Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
- При работе с образцами и культурами используйте защитные пер
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Тип питательной среды
| Тип питательной среды | Диагностический |
|---|
Сертификат
| Сертификат | ФСЗ 2009/03709 |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
