HiMedia M1241F-500G Основа CPC агара с 1% целлобиозы

Основа питательной среды HiMedia M1241F-500G CPC агар с 1 % целлобиозы для культивирования и идентификации видов Vibrio в пищевых продуктах. Состав разработан в соответствии с методикой FDA BAM (1998) и предназначен для дифференциации Vibrio vulnificus от других видов Vibrio.

Принцип измерения и интерпретация

Среда CPC (целлобиоза, полимиксин и колистин) используется для выделения и дифференциации вибрионов. Виды Vibrio являются естественными обитателями солоноватых и солёных вод.

Принцип работы среды основан на следующем:

• Питательная база: пептон и HM пептон B обеспечивают необходимые азотистые соединения для роста вибрионов.
• Дифференциация: некоторые виды Vibrio ферментируют целлобиозу с образованием кислоты. Это фиксируется индикатором бромтимоловым синим, который в кислой среде становится жёлтым.
• Индикация pH: крезоловый красный служит индикатором щелочного диапазона (становится красным при повышении pH). Щелочная среда способствует более эффективному восстановлению вибрионов.
• Селективность: штаммы Vibrio cholerae (за исключением классического биотипа O1) растут на CPC-агаре, в то время как большинство штаммов Vibrio parahaemolyticus подавляются.
• Визуальные признаки: при отсутствии ферментации целлобиозы колонии имеют зелёно-пурпурный цвет. При длительной инкубации может развиться пурпурный фон среды.

Методика проведения анализа

1. Подготовка пробы: примерно 25 г образца пищевого продукта смешивают с 225 мл щелочной пептонной воды.
2. Инкубация: пробу инкубируют при температуре 35 ±2 °C от 6–8 часов до ночи (в зависимости от типа образца).
3. Посев: петлёй переносят культуру на поверхность подсушенных чашек с CPC-агаром (основа M1241F с добавлением модифицированной добавки CPC FD110F для получения mCPC-агара или добавки колистина FD298 для получения CC-агара).
4. Инкубация и оценка: чашки инкубируют при 39–40 °C в течение 18–24 часов.
5. Результат: типичные колонии V. cholerae мелкие, гладкие, опалесцирующие, от зелёного до пурпурного цвета. Для подтверждения вида проводят биохимические тесты.

Приготовление среды

1. Растворить 60,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона модифицированной добавки CPC (FD110F) или добавки колистина (FD298).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,6 ± 0,2

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: гомогенный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: от оливково-зелёного до светло-коричневого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 6,01 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 7,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

(наблюдаются при добавлении модифицированной добавки CPC FD110F или добавки колистина FD298 после инкубации при 39–40 °C в течение 18–24 часов)

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пищевые продукты, молочные продукты.
• Ограничения: из-за вариативности питательных свойств некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на данной среде.
• Меры предосторожности: работа с образцами и культурами должна проводиться в соответствии с правилами микробиологической лабораторной практики. Загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.