HiMedia M1241F-100G Основа CPC агара с 1% целлобиозы

Основа CPC агара с 1% целлобиозы HiMedia M1241F-100G для культивирования и идентификации видов Vibrio в пищевых продуктах. Среда разработана в соответствии с методикой FDA BAM (1998) и предназначена для дифференциации Vibrio vulnificus от других представителей рода Vibrio.

Принцип измерения

Среда CPC (целлобиоза, полимиксин и колистин) используется для разделения видов Vibrio. Большинство штаммов Vibrio parahaemolyticus не растут на данной среде, в то время как штаммы Vibrio cholerae (за исключением классического биотипа O1) растут, образуя колонии зелёно-пурпурного цвета из-за отсутствия ферментации целлобиозы.

В состав входят пептон и HM пептон B (эквивалент мясного экстракта), обеспечивающие необходимые азотистые соединения. Целлобиоза ферментируется некоторыми видами Vibrio с образованием кислоты, что фиксируется индикатором бромтимоловым синим (переход в жёлтый цвет при кислом pH). Красный крезол служит индикатором щелочного диапазона (переход в красный цвет). Щелочная среда способствует более эффективному выделению вибрионов.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка

1. Смешайте примерно 25 г образца продукта с 225 мл щелочной пептонной воды.
2. Инкубируйте смесь при температуре 35 ±2 °C от 6–8 часов до ночи (в зависимости от типа образца).

Посев и инкубация

1. Перенесите петлёй культуру из обогатительного бульона на поверхность высушенных чашек с CPC агаром (основа M1241F с добавлением модифицированной добавки CPC FD110F для получения mCPC агара или добавки колистина FD298 для получения CC агара).
2. Инкубируйте при температуре 39–40 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Типичные колонии V. cholerae мелкие, гладкие, матовые, имеют зелёный или пурпурный цвет. При длительной инкубации может развиться пурпурный фон среды. Для окончательного подтверждения организмов проводятся биохимические тесты.

Приготовление среды

1. Растворите 60,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое одной ампулы модифицированной добавки CPC (FD110F) или добавки колистина (FD298).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное
• Конечный pH (при 25 °C): 7,6 ±0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: оливково-зелёный или светло-коричневый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании модифицированной добавки CPC (FD110F) или добавки колистина (FD298) после инкубации при 39–40 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пищевые продукты.
• Ограничения: из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост на данной среде.
• Меры предосторожности: при работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности. Использованные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.