HiMedia M1241-500G Основа CPC агара

Основа сухой питательной среды HiMedia M1241-500G CPC агар для культивирования и идентификации видов Vibrio из проб пищевых продуктов. Селективная дифференциальная среда позволяет отличать Vibrio vulnificus от других вибрионов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда CPC агар (Cellobiose, Polymyxin and Colistin) разработана в соответствии с методиками APHA для выделения и идентификации видов Vibrio. Среда является селективной и дифференциальной, что позволяет дифференцировать Vibrio vulnificus от других представителей рода. Штаммы Vibrio cholerae (за исключением классического биотипа 01) растут на данной среде, в то время как большинство штаммов Vibrio parahaemolyticus подавлены.

В состав входят пептон и HM пептон B, которые обеспечивают микроорганизмы необходимыми азотистыми и углеродными соединениями, длинноцепочечными аминопептидами, витаминами и другими питательными веществами. Целлобиоза ферментируется некоторыми видами Vibrios с образованием кислоты, что фиксируется индикатором бромтимоловым синим (переход в жёлтый цвет при кислом pH). Красный крезол служит индикатором щелочного диапазона (переход в красный цвет). Щелочное значение pH среды способствует более эффективному восстановлению вибрионов.

Методика проведения анализа

Подготовка образца

1. Смешайте примерно 25 г образца пищевого продукта с 225 мл щелочной пептонной воды (M618).
2. Перенесите петлёй культуру с поверхности роста из щелочной пептонной воды (M618) или желатин-фосфатно-солевого бульона на поверхность высушенных чашек с CPC-агаром.
3. Выполните посев штрихом для получения изолированных колоний.
4. Инкубируйте чашки при температуре 40–42 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Типичные колонии V. cholerae на CPC-агаре мелкие, гладкие, опалесцирующие, окрашены от зелёного до пурпурного цвета (из-за наличия двух индикаторов: бромтимолового синего и красного крезола). При длительной инкубации может развиться пурпурный фон среды.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 32,54 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое одной ампулы добавки CPC Supplement (FD110), предварительно регидратированной.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: от оливково-зелёного до светло-коричневого, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Реакция (pH 6,5% водного раствора при 25 °C): 7,6 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 40 $\pm$ 2 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Ограничения

• Колонии V. cholerae имеют специфический цвет (зелёный/пурпурный) из-за системы индикаторов.
• При затянувшейся инкубации фон среды становится пурпурным, что может затруднить визуальный анализ.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с образцами, подлежат обязательному обеззараживанию путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.