HiMedia M1241-500G Основа CPC агара

Питательная среда HiMedia M1241-500G Основа CPC агара — порошкообразная основа массой 500 г для приготовления селективно-дифференциальной среды. Применяется для культивирования и идентификации видов Vibrio в пищевых продуктах и образцах воды; готовую среду инкубируют при 40–42 °C в течение 18–24 ч.

Назначение

Основа CPC-агара предназначена для приготовления питательной среды для культивирования и идентификации видов Vibrio из пищевых продуктов и образцов воды.

CPC-агар — селективная и дифференциальная агаризованная среда, разработанная для дифференциации Vibrio vulnificus от других видов Vibrio. Штаммы Vibrio cholerae, за исключением V. cholerae 01 классического биотипа, растут на CPC-агаре, тогда как большинство штаммов Vibrio parahaemolyticus на CPC-агаре не растёт.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

HM пептон B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio являются естественными обитателями солоноватой и морской воды. Заболевания человека могут быть связаны с употреблением загрязнённой воды или загрязнённых морепродуктов. Раневые и системные инфекции развиваются после контакта с загрязнённой водой.

CPC-агар, содержащий целлобиозу, полимиксин и колистин, приготовлен на основе формулы APHA и рекомендован для культивирования и идентификации видов Vibrio в пищевых продуктах.

Пептон и HM пептон B обеспечивают виды Vibrio необходимыми азотсодержащими и углеродсодержащими соединениями, длинноцепочечными аминопептидами, витаминами и другими питательными веществами.

Некоторые виды Vibrio ферментируют целлобиозу с образованием кислоты. Кислая реакция определяется по индикатору pH бромтимоловому синему, который приобретает жёлтую окраску в кислой среде. Крезоловый красный является индикатором щелочного диапазона pH и приобретает красную окраску в щелочной среде. Щелочной pH среды повышает эффективность выделения видов Vibrio.

Типичные колонии V. cholerae на CPC-агаре имеют небольшой размер, гладкую поверхность, непрозрачную структуру и окраску от зелёной до фиолетовой. Фиолетовый фон также может развиваться в CPC-агаре при увеличении времени инкубации.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 32,54 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона добавки CPC Supplement (FD110).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки образцов и посева

1. Для пищевого образца смешайте приблизительно 25 г пробы с 225 мл щелочной пептонной воды (M618).
2. Перенесите петлёй материал с поверхности роста из щелочной пептонной воды (M618) или желатин-фосфатно-солевого бульона на поверхность высушенных чашек с CPC-агаром.
3. Выполните штриховой посев таким образом, чтобы получить изолированные колонии.
4. Инкубируйте чашки с CPC-агаром при 40–42 °C в течение 18–24 ч.

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей практики микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Колонии V. cholerae на CPC-агаре имеют небольшой размер, гладкую поверхность, непрозрачную структуру и окраску от зелёной до фиолетовой, поскольку CPC-агар содержит два индикатора pH: бромтимоловый синий и крезоловый красный.
2. При чрезмерном увеличении продолжительности инкубации фон CPC-агара становится фиолетовым.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оливково-зелёного или светло-коричневого цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 6,5 % при 25 °C; pH 7,6 ± 0,2.

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 40 ± 2 °C в течение 18–24 ч.