HiMedia M1228-500G Основа LPM агара

Основа питательной среды HiMedia M1228-500G Основа LPM агара — порошковая среда массой 500 г для приготовления агара. Среда предназначена для выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и молочных образцов, при этом для дифференциации видов Listeria требуются дополнительные биохимические исследования.

Назначение

Основа LPM-агара рекомендована для выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и молочных образцов.

Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы.

Готовая среда применяется после добавления восстановленного содержимого одного флакона селективной добавки MX Selective Supplement (FD151).

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Состав, г/л:

Эквивалент: мясной экстракт.

Происхождение: животное.

Физическая форма: порошок.

Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).

Масса: 500 г.

Принцип действия и интерпретация

Первый зарегистрированный пищевой вспышечный случай листериоза был описан в 1985 году. Микробиологические и эпидемиологические данные по спорадическим и эпидемическим случаям листериоза показывают, что основным путём передачи инфекции является употребление пищевых продуктов, загрязнённых Listeria monocytogenes.

Микроорганизм выделяли на предприятиях промышленной переработки молока и других пищевых продуктов. Listeria широко распространены в природе и обнаруживаются в различных необработанных пищевых продуктах, почве, сточных водах, силосе и речной воде.

Виды Listeria растут в диапазоне pH 4,4–9,6 и сохраняются в пищевых продуктах с уровнем pH за пределами этого диапазона. Наиболее выраженная подвижность наблюдается при 20 °C.

L. monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, вызывающий тяжёлые инфекции у беременных женщин, которые могут приводить к выкидышу, мертворождению или рождению ребёнка с менингитом, а также к первичной бактериемии у взрослых и детей.

LPM-агар разработан Lee и McClain как модификация агара Макбрайда для Listeria. Среда повышает выделение небольшого количества L. monocytogenes из образцов со смешанной микрофлорой. Среда также применяется при исследовании пищевых и молочных образцов согласно методикам APHA.

Функции компонентов LPM-агара:

• триптон, пептон и пептон HM B служат источниками азота, витаминов и минеральных веществ;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• ангидрид глицина повышает восстановление Listeria;
• хлорид лития, моксалактам и фенилэтанол подавляют грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы, включая виды Staphylococcus, Proteus и Pseudomonas;
• Listeria monocytogenes образуют сине-зелёную иризацию при исследовании в косопроходящем свете.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 50,50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 12 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки MX Selective Supplement (FD151).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и проведение анализа

Жидкие образцы

1. Отберите пипеткой 25 мл образца.
2. Перенесите образец в 225 мл бульона для обогащения Listeria во флакон объёмом 500 мл.
3. Тщательно перемешайте встряхиванием.
4. После инкубации в течение 24 ч, а затем повторно через 48 ч, обогащённую культуру высейте штриховым методом на LPM-агар (M1228).
5. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 48 ч.
6. Предположительные колонии Listeria отбирайте при подсветке проходящим светом под углом, при температуре 45 °C.

Твёрдые образцы

1. Взвесьте 25 г образца и перенесите в пакет для гомогенизатора.
2. Добавьте 225 мл бульона для обогащения Listeria.
3. Гомогенизируйте образец в течение 2 мин.
4. Инкубируйте смесь в пластиковом пакете при 30 °C.
5. После инкубации в течение 24 ч, а затем повторно через 48 ч, обогащённую культуру высейте штриховым методом на LPM-агар (M1228).
6. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 48 ч.
7. Предположительные колонии Listeria отбирайте при подсветке проходящим светом под углом, при температуре 45 °C.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Среда не является дифференциальной. Для идентификации и различения видов Listeria требуются дополнительные биохимические исследования.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении согласно инструкции на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид

Внешний вид: однородный, легко пересыпаемый порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция и pH

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,05 % при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены после добавления селективной добавки MX Selective Supplement (FD151) и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения