Основа агара LPM для листерий HiMedia M1228-100G (уп/100 гр)

Элективная питательная среда Основа агара LPM для листерий HiMedia M1228-100G (уп/100 гр) предназначена для выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых и молочных продуктов. Основа используется для обогащения и последующего посева образцов, но не является дифференциальной средой, поэтому для идентификации видов Listeria требуются дополнительные биохимические исследования.

Назначение

Основа агара LPM предназначена для выделения и культивирования Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и молочных образцов. Среда рекомендована для анализа пищевых и молочных проб, включая контроль образцов после этапа обогащения.

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 100 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Пептон HM B является эквивалентом мясного экстракта.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 50,50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 12 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки MX Selective Supplement (FD151).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Первый зарегистрированный пищевой случай групповой заболеваемости листериозом произошёл в 1985 году. Микробиологические и эпидемиологические данные по спорадическим и эпидемическим случаям листериоза показывают, что основным путём передачи инфекции является употребление пищевых продуктов, контаминированных Listeria monocytogenes.

Микроорганизм выделяли на коммерческих молочных и других пищевых предприятиях. Listeria широко распространены в природе и встречаются в различных необработанных пищевых продуктах, почве, сточных водах, силосе и речной воде. Виды Listeria растут в диапазоне pH 4,4–9,6 и сохраняются в пищевых продуктах со значениями pH за пределами этого диапазона. Наиболее выраженная подвижность наблюдается при 20 °C.

L. monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, вызывающий тяжёлые инфекции у беременных женщин, которые могут приводить к выкидышу, мертворождению или рождению ребёнка с менингитом. У взрослых и детей инфекция может вызывать первичную бактериемию.

Среда LPM разработана как модификация агара Мак-Брайда для листерий. Среда повышает выделение небольшого количества L. monocytogenes из образцов со смешанной микрофлорой. Американская ассоциация общественного здравоохранения также рекомендует применение этой среды для исследования пищевых и молочных образцов.

Функции компонентов среды:

• Триптон, пептон и пептон HM B являются источниками азота, витаминов и минеральных веществ.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Ангидрид глицина улучшает восстановление Listeria.
• Хлорид лития, моксалактам и фенилэтиловый спирт подавляют грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы, включая виды Staphylococcus, Proteus и Pseudomonas.
• Listeria monocytogenes при исследовании в косопроходящем свете проявляет сине-зелёную иризацию.

Тип образцов

• Пищевые образцы
• Молочные образцы

Отбор и подготовка образцов

Жидкие образцы

1. Пипетируйте 25 мл образца в 225 мл бульона для обогащения листерий, помещённого в колбу объёмом 500 мл.
2. Тщательно перемешайте содержимое встряхиванием.
3. После инкубации обогащённую культуру высевайте штриховым методом на агар LPM M1228 через 24 ч и повторно через 48 ч.

Твёрдые образцы

1. Взвесьте 25 г образца и поместите в пакет для гомогенизатора.
2. Добавьте 225 мл бульона для обогащения.
3. Гомогенизируйте образец в течение 2 мин.
4. Инкубируйте смесь в пластиковом пакете при 30 °C.
5. После инкубации в течение 24 ч и повторно через 48 ч высевайте обогащённую культуру штриховым методом на агар LPM M1228.
6. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 48 ч.
7. Предположительные колонии Listeria отбирайте при трансиллюминации при температуре 45 °C.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Среда не является дифференциальной. Для идентификации и различения видов Listeria необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,05 % при 25 °C:

• pH: 7,3 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки MX Selective Supplement (FD151) и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Условия хранения: плотно закрытая упаковка, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения
• После вскрытия: хранить продукт в