Основа селективного бульона для Yersinia с иргазаном HiMedia M1220-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа селективного бульона для Yersinia с иргазаном HiMedia M1220-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — порошковая основа ITC-бульона для селективного обогащения Yersinia enterocolitica. Применяется для селективного обогащения и подсчёта Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах и кормах для животных; рабочая среда содержит иргазан, тикарциллин и хлорат калия.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного обогащения и количественного определения Yersinia enterocolitica. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 10273:2017 и ISO 11133:2014 (E) с поправкой Amd.2:2020.

Тип образца: пищевые продукты и корма для животных.

Среда ITC разработана как селективная обогатительная среда для выделения Yersinia enterocolitica из пищевых продуктов. В оригинальном описании также указана рекомендация международного комитета по ISO 10273:1994.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: M1220-500G ITC Broth Base, основа ITC-бульона; также обозначается как основа TTC-бульона
• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Масса упаковки: 500 г

Состав среды

Спецификация ISO: ITC-бульон с иргазаном, тикарциллином и хлоратом калия

Концентрации приведены в г/л.

M1220 — основа ITC-бульона (основа TTC-бульона)

Концентрации приведены в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Ферментативный перевар казеина эквивалентен триптону.

Селективные добавки

Селективная добавка Tic (FD102), 1 флакон:

• Тикарциллин: 1 мг

Селективная добавка PC (FD103), 1 флакон:

• Хлорат калия: 1 г
• Дистиллированная вода: 10,00 мл

По заявке поставляется:

• FD102 — тикарциллиновая добавка.

Принцип действия и интерпретация

Род Yersinia относится к семейству Enterobacteriaceae. Представители рода обычно положительны по нитратредуктазе и обладают ферментативным типом метаболизма. Род включает 11 видов, наиболее важным из которых как возбудителем пищевых инфекций человека является Yersinia enterocolitica.

Для выделения энтеропатогенных бактерий из пищевых продуктов применяют одно- или двухэтапное обогащение перед высевом на селективные дифференциальные агаризованные среды. ITC-бульон сформулирован в соответствии с APHA и рекомендован ISO как селективная среда обогащения для Yersinia enterocolitica из пищевых продуктов. Среда разработана Wauters и соавторами как новый обогатительный бульон на основе модифицированного бульона Раппапорта с селективными агентами иргасаном, тикарциллином и хлоратом калия.

• Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества для роста.
• Тикарциллин ингибирует грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.
• Иргасан ингибирует грамположительные микроорганизмы.
• Хлорат калия обладает дезинфицирующими свойствами.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,12 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды, в 988 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки Tic (FD102) и селективной добавки PC (FD103).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы необходимого типа.

Методика подготовки образцов и анализа

Первичное обогащение в бульоне PSB

1. Поместите образец в известный объём бульона PSB (M9411), чтобы получить разведение 1/10 по массе/объёму или объёму/объёму.
2. Гомогенизируйте суспензию с использованием перистальтического гомогенизатора в течение 2 мин.
3. Инкубируйте при 22–25 °C в течение 2–3 суток при перемешивании или 5 суток без перемешивания.

Вторичное обогащение в ITC-бульоне

1. Аналогичным способом подготовьте вторичную суспензию в ITC-бульоне (M1220), чтобы получить разведение исследуемой порции в обогатительной среде 1/100 по массе/объёму или объёму/объёму.
2. Инкубируйте при 25 °C в течение 48 ч.

Выделение

1. Перенесите культуру, полученную из бульона PSB, на поверхность чашки с агаром CIN и инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
2. Для щелочной обработки стерильной пипеткой перенесите 0,5 мл культуры PSB в 4,5 мл раствора KOH и перемешивайте только в течение 20 с.
3. Немедленно выполните посев обработанной культуры на чашку с агаром CIN.
4. Инкубируйте чашку при 30 °C в течение 24–48 ч.
5. Культуру из ITC-бульона нанесите на поверхность чашки с агаром CIN (M843I).
6. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.

Очистка культуры

Выделенные колонии пересевают штриховым методом на поверхность питательного агара (M561A) и инкубируют при 30 °C в течение 24 ч.

Подтверждение

Для подтверждения проводят биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор павлинье-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция и pH

Реакция водного раствора с концентрацией 4,41 % масс./объём при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленными Tic (FD102) и PC (FD103) при 25 ±