Питательный агар с высоким содержанием соли HiMedia M1218-500G (уп/500 гр)

Питательный агар с высоким содержанием соли HiMedia M1218-500G (уп/500 гр) — питательная среда производства HiMedia для выделения и культивирования солеустойчивых видов Vibrio, содержащая 30,000 г/л хлорида натрия. Среда предназначена для анализа клинических и пищевых образцов и селективного выделения отдельных видов Vibrio благодаря высокой концентрации NaCl и щелочному pH 8,5 ± 0,2.

Назначение и область применения

Питательный агар HiMedia M1218-500G рекомендован для выделения и культивирования солеустойчивых видов Vibrio.

Среда применяется для:

• исследования клинических образцов, включая фекалии;
• исследования пищевых образцов;
• выделения, культивирования и подтверждения солеустойчивых видов Vibrio в продуктах, предназначенных для употребления человеком или кормления животных;
• дифференциации аэробного и анаэробного роста.

Применение среды для подтверждения солеустойчивых видов Vibrio указано в соответствии со спецификацией ISO/DIS 8914:1990.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности. HM-экстракт эквивалентен мясному экстракту.

• Конечный pH при 25 °C: 8,5 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio обычно достаточно легко выделяются из клинических образцов и объектов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины.

Vibrio parahaemolyticus является одной из основных причин бактериальной диареи, связанной с употреблением загрязнённых пищевых продуктов. Селективность среды в отношении Vibrio может повышаться добавлением подходящих селективных агентов. Высокая концентрация NaCl и щелочной pH также используются для выделения отдельных видов Vibrio, способных расти при pH выше 8,0 и концентрации NaCl 3 % и более.

Vibrio cholerae относится к негалофильным видам Vibrio: данный микроорганизм не способен расти на средах с концентрацией хлорида натрия выше 5–6 % и может расти на средах без NaCl.

Пептон и HM-экстракт являются источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды и обеспечивает наличие необходимых ионов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 55 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Пробоподготовка и посев

1. Внесите 25 г исследуемой порции в 225 мл основы солево-полимиксинового бульона (M821I) и 225 мл щелочной пептонной воды (M6181).
2. Инкубируйте оба бульона при 35–37 °C в течение 7–8 ч.
3. После инкубации выполните посев петлёй из среды M8211 на тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар (TCBS), основу триптон-сахарозо-тетразолийного агара (M1217) и питательный агар с высоким содержанием соли (M1218).
4. Повторите процедуру посева для среды M6181.
5. Инкубируйте чашки при 35–37 °C в течение 20–24 ч.
6. Подтвердите предположительно выявленные колонии Vibrio с помощью биохимических тестов.
7. Для подтверждения можно выполнить посев на агар с высоким содержанием соли, пептоном и дрожжевым экстрактом (M1219).

Для полной идентификации биохимическую характеристику проводят из чистых изолятов.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначение * соответствует номерам WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотное, сопоставимое с гелем, содержащим 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 5,5 % масс./об. при 25 °C.
• pH по реакции: 8,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 8,30–8,70.

Тип образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.

Ограничения применения

1. Требуется дальнейший высев из обогащённого бульона на селективные среды.
2. Для полной идентификации биохимическую характеристику проводят из чистых изолятов.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик продукт следует использовать в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Среда предназначена для диагностики in vitro.

При работе необходимо:

• прочитать этикетку перед открытием контейнера;
• использовать защитные перчатки;
• использовать защитную одежду;
• использовать средства защиты глаз;
• использовать средства защиты лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами;
• соблюдать стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами в соответствии с установленными руководствами;
• при необходимости обращаться к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Условия оценки эффективности

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.