Основа триптон-сахарозного агара с ТТХ (TSTA) HiMedia M1217-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа триптон-сахарозного агара с ТТХ (TSTA) HiMedia M1217-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — порошковая среда для выделения видов Vibrio с добавлением хлорида трифенилтетразолия. Основа применяется для анализа клинических образцов и пищевых продуктов, включая выявление Vibrio parahaemolyticus, при конечном pH 7,1 ± 0,2.

Назначение

Среда рекомендована для выделения видов Vibrio после обогащения образца в основе солевого полимиксинового бульона. Для дифференциации Vibrio parahaemolyticus используется восстановление 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC) с образованием красных формазановых красителей, визуализируемых в виде красных колоний.

Применение:

• клинические образцы — фекальные образцы;
• пищевые образцы.

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Представители семейства Vibrionaceae — прямые или изогнутые грамотрицательные палочки, подвижные благодаря полярным жгутикам. Для роста многих штаммов требуется 2–3 % хлорида натрия; основная природная среда обитания этих микроорганизмов — водные среды.

Из 3 признанных видов Vibrio 12 были связаны с желудочно-кишечными и внекишечными инфекциями человека; наиболее значимым возбудителем является холерный вибрион. Наиболее часто из клинических образцов выделяют штаммы Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Vibrio mimicus и Vibrio alginolyticus.

Триптон и соевый пептон являются источниками азотистых соединений и других необходимых для роста питательных веществ. Сахароза служит источником энергии. Высокая концентрация соли обеспечивает селективность среды. Желчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Vibrio parahaemolyticus восстанавливает TTC с образованием красных формазановых красителей, благодаря чему формируются визуально различимые красные колонии.

Триптон-сахарозный тетразолиевый агар разработан на основе среды Kourany и одобрен комитетом ISO для выделения видов Vibrio, особенно Vibrio parahaemolyticus.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 85,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа (1,03 бар), при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 3 мл 1%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (TTC), артикул FD057.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

1. Внесите 25 г исследуемого образца в 225 мл основы солевого полимиксинового бульона, артикул M8211.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 7–8 ч.
3. После инкубации перенесите петлю полученной культуры на агар TCBS и на основу триптон-сахарозного тетразолиевого агара, артикул M1217.
4. Предположительно положительные колонии Vibrio parahaemolyticus дополнительно подтвердите подходящими биохимическими тестами.
5. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией стерилизуйте автоклавированием.

Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Технические характеристики

• Тип изделия: основа питательной среды
• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1217-500G
• Масса упаковки: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Методические документы: МР 02.009-06, Саратов, 2006

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 8,55 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на этой среде.
• Предположительно положительные колонии Vibrio parahaemolyticus необходимо дополнительно подтверждать подходящими биохимическими тестами.
• Ожидаемые эксплуатационные характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции на этикетке, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Ёмкость: хранить в плотно закрытом контейнере.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Меры безопасности

Изделие предназначено для диагностики in vitro и профессионального применения.

При работе с образцами и культурами необходимо:

• прочитать маркировку перед открытием контейнера;
• использовать защитные перчатки;
• использовать защитную одежду;
• использовать средства защиты глаз;
• использовать средства защиты лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• соблюдать стандартные меры предосторожности при работе с клиническими образцами;
• при необходимости обращаться к индивидуальным паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от неселективных питательных агаров, состав TSTA сочетает повышенную концентрацию хлорида натрия и желчные соли для селективного подавления части сопутствующей микрофлоры с индикаторной реакцией TTC, позволяющей визуализировать красные колонии Vibrio parahaemolyticus.

Комплект поставки

• Основа триптон-сахарозного агара с ТТХ (TSTA) HiMedia M1217-500G — 500 г.