HiMedia M1214F-500G Модифицированный агар с триптоном, соей и дрожжевым экстрактом

Модифицированный агар с триптоном, соей и дрожжевым экстрактом HiMedia M1214F-500G предназначен для подтверждения наличия Listeria и Yersinia в соответствии с методиками FDA BAM. Среда используется для выделения и культивирования L. monocytogenes и Yersinia из пищевых продуктов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда является питательной и содержит ферментативный гидролизат казеина и папаиновый гидролизат соевой муки, которые обеспечивают микроорганизмы аминокислотами и другими сложными азотистыми веществами. Дрожжевой экстракт служит богатым источником витаминов группы B, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс клеток, а агар выступает в роли отвердителя.

Данная среда рекомендуется для очистки изолированных колоний, так как на селективных средах бактерии могут находиться в контакте с частично подавленными конкурентами. Комитет ISO также рекомендует использовать эту среду для подтверждения видов Listeria.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 46 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура выделения L. monocytogenes из молочных продуктов

1. Инокулируйте пробу в обогатительный бульон и инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 часов.
2. Высейте культуру на селективный агар, содержащий эскулин и цитрат железа (например, агар LPM M1228, оксфордский агар для листерий M1145F/M1145 или агар PALCAM M1064), и инкубируйте при 35 °C в течение 48 часов.
3. Предположительные колонии Listeria на средах с эскулином образуют черный ореол.
4. Перенесите 5 или более типичных колоний на модифицированный агар с триптоном, соей и дрожжевым экстрактом (M1214F) для проверки чистоты и получения типичных изолированных колоний.
5. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 часов (допускается инкубация при 35 °C, если колонии не будут использоваться для изучения подвижности в «живой капле»).

Интерпретация результатов

Осмотрите колонии с помощью оптической системы Генри (косое освещение белым светом под углом 45°) или под низким увеличением микроскопа.

• Колонии Listeria имеют сине-серый или синий цвет.
• Другие колонии обычно имеют желтый или оранжевый цвет.

Работа с видами Yersinia

Для биохимической характеристики Yersinia рост с косого агара с лизином, аргинином и железом (M1230) пересевают на одну чашку модифицированного агара с триптоном, соей и дрожжевым экстрактом (M1214F) и инкубируют при комнатной температуре в течение 24–48 часов. Полученная культура далее используется для подтверждающих биохимических тестов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Внешний вид: от кремового до желтого гомогенного свободнотекущего порошка
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH водного раствора (4,6 % w/v) при 25 °C: 7,10–7,50

Спецификации производителя

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 30 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.