Псевдомонадный агар HiMedia M120-500G (уп/500 гр)

Псевдомонадный агар HiMedia M120-500G (уп/500 г) для выявления продукции флуоресцеина видами Pseudomonas. Среда соответствует ГОСТ Р 54354-2011 и предназначена для анализа фармацевтических образцов.

Принцип измерения

Псевдомонадный агар (для флуоресцеина) разработан на основе формулы Кинга и модифицирован в соответствии с требованиями Фармакопеи США (USP) для обнаружения флуоресцеина — водорастворимого, нерастворимого в хлороформе флуоресцентного пигмента, вырабатываемого видами Pseudomonas.

Среда стимулирует выработку флуоресцеина и подавляет образование пиоцианина. Флуоресцеин диффундирует из колоний Pseudomonas в агар, придавая ему жёлтый флуоресцентный цвет. Некоторые штаммы Pseudomonas вырабатывают небольшое количество пиоцианина, что приводит к желтовато-зелёному окрашиванию.

Роль компонентов:

• Триптон и протеоз-пептон: обеспечивают необходимые азотистые питательные вещества, углерод, серу и микроэлементы для роста Pseudomonas.
• Гидрофосфат калия: служит буфером среды.
• Сульфат магния: обеспечивает катионы, необходимые для активации выработки флуоресцеина.

Особенности анализа:

• Концентрация соли выше 2 % отрицательно влияет на выработку пигмента.
• УФ-излучение может обладать бактерицидным действием, поэтому перед помещением культуры под УФ-лампу необходимо убедиться в достаточном росте микроорганизмов.
• Штаммы Pseudomonas, вырабатывающие пиоцианин, обычно также вырабатывают флуоресцеин; их дифференциация от простых флуоресцентных псевдомонад проводится иными методами.
• Температура является определяющим фактором: большинство флуоресцентных штаммов растут при 25–30 °C и не растут при 35 °C.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция (pH): 7,0 $\pm$ 0,2 при 25 °C (для 3,8 % водного раствора с 1 % глицерином).
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 1 % глицерина после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа фармацевтических образцов. При сборе и обработке проб следует руководствоваться установленными правилами работы с биоматериалами.

Ограничения:

• Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) микроорганизмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации (сжиганию) в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.