Триптон-дрожжевой агар с бромкрезоловым пурпурным HiMedia M1193-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Триптон-дрожжевой агар с бромкрезоловым пурпурным HiMedia M1193-500G для изоляции и количественного определения бактерий семейства Enterobacteriaceae. Среда разработана в соответствии со спецификациями стандарта ISO 7402:1993; в качестве индикатора используется бромкрезоловый пурпурный.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для выделения и подсчёта бактерий семейства Enterobacteriaceae, которые широко распространены в окружающей среде (вода, почва) и могут быть патогенами (например, Salmonella, Klebsiella), вызывая пищевые заболевания.

Механизм работы среды основан на следующем:

• Питательные вещества: ферментативный гидролизат казеина и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, витамины комплекса B и другие компоненты, необходимые для роста.
• Углевод: декстроза служит ферментируемым углеводом.
• Индикатор: бромкрезоловый пурпурный меняет цвет с пурпурного на жёлтый в кислых условиях, что свидетельствует о ферментации углеводов.
• Осмотический баланс: поддерживается за счёт добавления хлорида натрия.

Методика проведения анализа

Подсчёт Enterobacteriaceae может быть выполнен двумя способами:

Метод наиболее вероятного числа (MPN)

1. Инокулируют 10 мл исследуемого образца или начальной суспензии в 3 пробирки с бульоном Эндо (EE Broth M2871) двойной концентрации, и 1 мл образца в 3 пробирки с бульоном EE Broth (M2871) одинарной концентрации.
2. В ещё 3 пробирки с бульоном EE Broth (M2871) одинарной концентрации инокулируют по 1 мл первого десятикратного разведения (10⁻¹) образца.
3. Инкубируют все 9 пробирок при 35–37 °C в течение 24 часов.
4. Петлёй переносят культуру из каждой пробирки на агар VRBGA без лактозы (M581).
5. Инкубируют чашки при 35–37 °C в течение 24 часов.
6. Предположительные типичные красные, розовые или бесцветные слизистые колонии подтверждают биохимически.

Метод подсчёта колоний

1. Переносят 1 мл исследуемого образца в две стерильные чашки Петри.
2. В ещё две стерильные чашки переносят по 1 мл первого десятикратного разведения. Процедуру повторяют для последующих разведений.
3. В каждую чашку асептически добавляют 15 мл стерильного охлаждённого агара VRBGA без лактозы (M581). Перемешивают и охлаждают.
4. После полного затвердевания наносят верхний слой (10–15 мл) стерильного агара VRBGA без лактозы (M581), охлаждённого до 45–50 °C.
5. После затвердевания инкубируют при 35–37 °C в течение 24 часов.
6. Выбирают предполагаемые колонии и проводят биохимическое подтверждение путём инокуляции в триптон-дрожжевой агар с бромкрезоловым пурпурным для проверки реакций ферментации.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 41,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Разлить по пробиркам и охладить в скошенном положении.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Значение pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках-скосах)
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярная среда
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03707
• Соответствие: состав соответствует стандарту ISO 7402:1993.