Основа сывороточной среды Лёффлера HiMedia M1189-500G (уп/500 гр)

Основа сывороточной среды Лёффлера HiMedia M1189-500G (уп/500 г) предназначена для культивирования Corynebacterium diphtheriae. Среда используется для первичной и вторичной изоляции требовательных патогенных микроорганизмов из мазков носа и горла; способствует восстановлению вирулентности и характерных морфологических свойств бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Лёффлера оптимизирована для выделения Corynebacterium diphtheriae (бациллы Клебса-Лёффлера) — грамположительного, неинкапсулированного, неподвижного факультативного анаэроба. Применение данной среды позволяет индуцировать образование обильных метахроматических гранул (волютина), что критически важно для предварительной идентификации возбудителя дифтерии.

Высокое содержание сыворотки позволяет определять протеолитическую активность микроорганизмов. Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Пептон, настой сердечной мышцы (HMH) и бычья сыворотка: обеспечивают аминокислоты и сложные азотистые вещества для роста Corynebacterium.
• Декстроза (глюкоза): источник ферментируемых углеводов и энергии.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

Состав

Состав основы, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 10,0 г основы в 250 мл очищенной или дистиллированной воды при температуре 45 °C.
2. Добавьте 750 мл стерильной бычьей сыворотки, тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
3. Проведите коагуляцию и стерилизацию методом инсписсации (уваривания) в течение 15 минут при температуре 80–90 °C или путем пропаривания при 100 °C в течение 10–15 минут.

Работа с образцами

• Типы образцов: ткани, мазки из носа и горла.
• Посев: мазок наносится непосредственно на поверхность среды.
• Инкубация: после инкубации готовятся мазки с поверхности скоса.
• Определение протеолиза: инокулируйте скос и перед инкубацией залейте его средой Brewer Thioglycollate HiVeg™ (MV019). Инкубируйте 3–4 дня (или дольше) до появления признаков протеолиза.
• Идентификация: рекомендуется использовать параллельно с сывороточным теллурит-агаром для селективной изоляции Corynebacterium. Окрашивайте мазки метиленовым синим по Лёффлеру для обнаружения метахроматических гранул. Колонии, обладающие каталазной активностью и типичной морфологией, пересевают на кровяной агар.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободный порошок от светло-желтого до коричневато-желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Базовая среда: прозрачный раствор светло-янтарного цвета.
  • После добавления сыворотки и коагуляции: опалесцирующие скосы грязно-белого цвета.
• Реакция (pH) базовой среды (10 г на 250 мл дистиллированной воды) при 25 °C: 7,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании среды с добавлением стерильной бычьей сыворотки после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Ограничения и предостережения

• Ограничения: образование метахроматических гранул характерно для видов Corynebacterium, однако другие организмы (например, Propionibacterium, Actinomyces и плеоморфные штаммы стрептококков) могут иметь схожие окрашенные гранулы.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое место, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.
• Утилизация: использованные препараты и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат автоклавированию или инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Назначение: Основа питательной среды.