HiMedia M118-5KG Основа агара с маннитом и солью

Основа питательной среды HiMedia M118-5KG Основа агара с маннитом и солью — сухая порошкообразная среда массой 5 кг для выделения патогенных стафилококков. HiMedia M118-5KG применяют для анализа клинических, пищевых и молочных образцов; высокая концентрация хлорида натрия подавляет рост бактерий, отличных от staphylococci, а ферментация маннита выявляется по изменению окраски индикатора фенолового красного.

Назначение и область применения

Основа агара с маннитом и солью рекомендована для выделения патогенных Staphylococci из клинических и неклинических образцов.

Среду применяют для исследования:

• клинических образцов, включая гной и мочу;
• пищевых образцов;
• молочных образцов;
• косметической продукции и других образцов.

Состав

Концентрация компонентов в готовой среде:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эксплуатационных характеристик. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Staphylococci широко распространены в природе, но преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительные виды, в частности Staphylococcus aureus, являются хорошо изученными условно-патогенными микроорганизмами человека.

Способность вызывать свёртывание плазмы остаётся широко используемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Staphylococci обладают характерной способностью расти на средах с высокой концентрацией соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на маннитно-солевом агаре с феноловым красным и добавлением 7,5 % NaCl использовали в методике Чапмена.

Основа агара с маннитом и солью предназначена для выделения коагулазоположительных Staphylococci из косметики, молока, пищевых продуктов и других образцов. Дополнительное свойство Staphylococcus aureus — липазную активность — можно выявить после добавления эмульсии яичного желтка FD045. Липазная активность визуализируется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Функции компонентов среды:

• пептон HM B и протеозный пептон обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами;
• хлорид натрия действует как ингибирующий компонент по отношению к бактериям, отличным от staphylococci;
• маннитол является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, которая обнаруживается индикатором феноловым красным;
• S. aureus ферментирует маннитол и образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами;
• коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннитол, поэтому формируют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирке или на предметном стекле. Липазную активность S. aureus выявляют добавлением в среду эмульсии яичного желтка.

Возможный S. aureus должен быть подтверждён коагулазным тестом. Кроме того, микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избытка соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест или другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.

Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннитол с задержкой. Поэтому отрицательные результаты необходимо повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией образцов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно ≈0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Среда содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном контакте с воздухом и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки, поэтому продукт необходимо хранить в плотно закрытой ёмкости в сухом месте, защищённом от яркого света.

Типы образцов и обращение с ними

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам. Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Предположительный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избытка соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест или другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать задержанную ферментацию маннитола. Отрицательные результаты необходимо повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией образцов.
4. Для подтверждения необходимо выполнить биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M118-5KG
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 5 кг
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 11,1 % масс./об. при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления для роста бактерий на агаре с переваром казеина соевых бобов принимают за 100 %.