Маннит-солевой агар HiMedia M118-500G (уп/500 гр)

Питательная элективная среда Маннит-солевой агар HiMedia M118-500G (уп/500 гр) — агаровая основа массой 500 г для микробиологического культивирования. Среда предназначена для выделения патогенных стафилококков из клинических и не-клинических образцов, включая пищевые и молочные продукты, при селективном действии 7,5 % хлорида натрия.

Назначение

Маннит-солевой агар HiMedia M118-500G предназначен для выделения патогенных Staphylococci из клинических и не-клинических образцов.

Среда применяется для выделения коагулазоположительных Staphylococci из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов. Дополнительное внесение эмульсии яичного желтка FD045 позволяет выявлять липазную активность Staphylococcus aureus.

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Соответствие: ГОСТ Р 54354-2011

Состав

Состав рассчитан на приготовление 1000 мл среды:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
Пептон HM B эквивалентен экстракту говядины.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Принцип действия и интерпретация результатов

Staphylococci широко распространены в природе, но преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является установленным условно-патогенным микроорганизмом человека.

Способность образовывать сгусток плазмы остаётся широко используемым критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Staphylococci обладают способностью расти на средах с высокой концентрацией соли. Маннит-солевой агар с феноловым красным и добавлением 7,5 % NaCl применяется для выделения коагулазоположительных Staphylococci из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов.

Принцип селективности и дифференциации:

• хлорид натрия действует как ингибирующий агент в отношении бактерий, отличных от Staphylococci;
• протеозопептон и пептон HM B обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами;
• маннит является сбраживаемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты;
• феноловый красный выявляет подкисление среды при ферментации маннита;
• S. aureus ферментирует маннит и образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами;
• коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит и образуют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами;
• липазная активность S. aureus выявляется после добавления эмульсии яичного желтка и проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирочном или предметно-стекольном варианте. Перед коагулазным и другими диагностическими тестами микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, например на питательный бульон M002, чтобы исключить возможное влияние соли на результаты анализа.

Некоторые штаммы S. aureus могут иметь замедленную ферментацию маннита. Поэтому отрицательные результаты необходимо повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией образцов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — около 0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• Клинические образцы: гной, моча и другие материалы.
• Пищевые и молочные образцы: сбор и обработку выполняют с использованием соответствующих методик.
• Клинические образцы обрабатывают в соответствии с установленными процедурами обращения с биологическим материалом.
• После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Предположительное наличие S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный и другие диагностические тесты; в качестве такой среды может использоваться питательный бульон M002.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать замедленную ферментацию маннита. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией.
4. Для подтверждения необходимо выполнить биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция 11,1 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеинового субстрата.