HiMedia M118-2.5KG Основа агара с маннитом и солью

Сухая питательная среда HiMedia M118-2.5KG Основа агара с маннитом и солью — порошковая основа с содержанием хлорида натрия 7,5 %. Среда предназначена для выделения патогенных стафилококков из клинических и неклинических образцов, при этом предположительно положительные по коагулазе колонии требуют подтверждения коагулазным тестом.

Назначение

Основа агара с маннитом и солью HiMedia M118-2.5KG рекомендована для выделения патогенных Staphylococci из клинических и неклинических образцов.

Тип продукта: стандартный
Форма: порошок
Масса: 2,5 кг
Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
Происхождение: животное

Состав

Состав на 1 л среды:

• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
  ** Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Методика приготовления

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Среда содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном контакте с воздухом и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки, поэтому продукт необходимо хранить в плотно закрытой ёмкости в сухом месте, защищённом от яркого света.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является известным условно-патогенным микроорганизмом человека. Способность свёртывать плазму остаётся наиболее широко используемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями.

Стафилококки обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на маннитно-солевом агаре с феноловым красным и добавлением 7,5 % NaCl используется для анализа косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов. Дополнительную липазную активность Staphylococcus aureus можно выявить после добавления эмульсии яичного желтка FD045: липазная активность проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Пептон HM B и протеозопептон обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия действует как ингибирующий компонент для бактерий, отличных от staphylococci. Маннитол служит ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, которая обнаруживается по изменению окраски индикатора фенолового красного.

Staphylococcus aureus ферментирует маннитол и образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннитол, поэтому формируют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирке или на предметном стекле. Возможный S. aureus также следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избыток соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.

Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннитол с задержкой. Поэтому отрицательные результаты следует инкубировать повторно ещё 24 ч перед утилизацией.

Типы образцов

• Клинические образцы: гной, моча и другие.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Продукт предназначен для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Предположительный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннитол с задержкой. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать ещё 24 ч перед утилизацией.
4. Для подтверждения необходимо выполнять биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 11,1 % при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеиновой среды принимают за 100 %.