Основа питательной среды HiMedia M118-10KG «Основа агара с маннитом и солью» производства HiMedia — сухая порошкообразная среда с содержанием хлорида натрия 7,5 %. HiMedia M118-10KG предназначена для выделения патогенных стафилококков из клинических и неклинических образцов, включая пищевые и молочные продукты; рабочая температура хранения составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа агара с маннитом и солью HiMedia M118-10KG рекомендована для выделения патогенных Staphylococci из клинических и неклинических образцов.

Типы образцов:

• клинические образцы: гной, моча и другие;
• пищевые и молочные образцы.

Состав

Состав среды:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

** Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Требования к хранению порошка

Продукт содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном контакте с воздухом и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки, поэтому порошок следует хранить в плотно закрытой таре в сухом месте, защищённом от яркого света.

Принцип действия и интерпретация результатов

Staphylococci широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, кожных железах и слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является признанным условно-патогенным микроорганизмом человека. Способность свёртывать плазму остаётся наиболее широко применяемым и общепринятым критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями.

Staphylococci обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на фенол-красном маннитном агаре с добавлением 7,5 % NaCl изучалось Chapman. Полученная основа агара с маннитом и солью предназначена для выделения коагулазоположительных Staphylococci из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов.

Дополнительное свойство Staphylococcus aureus — липазную активность — можно выявить после добавления эмульсии яичного желтка FD045. Липазная активность проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Пептон HM B и протеозопептон обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия действует как ингибирующий компонент для бактерий, отличных от staphylococci. Маннит является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, выявляемой индикатором феноловым красным.

Staphylococcus aureus ферментирует маннит и образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазонегативные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит, поэтому образуют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирке или на предметном стекле. Липазную активность S. aureus выявляют после внесения в среду эмульсии яичного желтка.

Возможный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом. Кроме того, микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избыточного содержания соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный тест или другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.

Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннит с задержкой. Поэтому отрицательные результаты следует инкубировать повторно ещё 24 ч перед отбраковкой.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Возможный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избыточного содержания соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный тест или другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннит с задержкой. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать ещё 24 ч перед отбраковкой.
4. Для подтверждения необходимо выполнить биохимические и серологические тесты.

Условия применения и безопасность

• Применение: для диагностики in vitro.
• Пользователь: только квалифицированный персонал.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 11,1 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеинового субстрата принимают за 100 %.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия тщательно закрывайте контейнер и храните продукт в сухом месте, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и