HiMedia M118-100G Основа агара с маннитом и солью

Сухая питательная среда HiMedia M118-100G «Основа агара с маннитом и солью» для изоляции патогенных стафилококков. Применяется для анализа клинических, пищевых и молочных проб; содержит 7,5 % NaCl для подавления роста нецелевой микрофлоры.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на способности стафилококков расти в условиях высокой концентрации соли. Основные компоненты выполняют следующие функции:

• Протеозопептон и пептон HM B: обеспечивают необходимые факторы роста и микроэлементы.
• Хлорид натрия (NaCl): выступает в роли ингибитора, подавляя рост большинства бактерий, кроме стафилококков.
• D-маннит: ферментируемый углевод. При его расщеплении образуются кислоты.
• Феноловый красный: индикатор, который меняет цвет с красного на жёлтый при закислении среды.

Staphylococcus aureus ферментирует маннит, в результате чего вокруг колоний образуются жёлтые зоны. Коагулазоотрицательные штаммы обычно не ферментируют маннит, образуя розовые или красные колонии в красном или пурпурном ореоле.

Дополнительно, при добавлении эмульсии яичного желтка (FD045), можно определить липолитическую активность S. aureus, которая проявляется в виде жёлтых опалесцирующих зон вокруг колоний.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости добавить 5 % (об/об) эмульсию яичного желтка (FD045), тщательно перемешать.
6. Разлить в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

• Клинические образцы: гной, моча и др.
• Пищевые и молочные образцы: сбор и обработка проводятся согласно установленным руководствам.
• Инкубация: 35–37 °C в течение 18–72 часов.

Ограничения и особенности анализа

1. Предварительно выявленные колонии S. aureus должны быть подтверждены коагулазным тестом (в пробирке или на предметном стекле).
2. Для проведения диагностических тестов (например, коагулазного) рекомендуется пересев организма на менее ингибирующую среду, не содержащую избытка соли (например, питательный бульон M002), чтобы избежать интерференции соли с реакцией.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут проявлять замедленную ферментацию маннита. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать в течение дополнительных 24 часов перед окончательным списанием.
4. Для окончательного подтверждения необходимо проведение биохимических и серологических тестов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 часов. Степень восстановления (Recovery) рассчитана относительно роста на соево-казеиновом агаре (Soybean Casein Digest Agar), принятом за 100 %.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: Из-за содержания 7,5 % хлорида натрия продукт гигроскопичен и склонен к образованию комков при контакте с воздухом. Хранить в сухом, вентилируемом месте, вдали от источников света и воспламенения.
• Утилизация: Использованные среды и загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию перед утилизацией.