HiMedia M118-100G Основа агара с маннитом и солью

Микробиологическая питательная среда HiMedia M118-100G Основа агара с маннитом и солью представляет собой порошковую основу для приготовления селективной среды с 7,5 % хлорида натрия. Предназначена для выделения патогенных стафилококков из клинических и не клинических образцов, включая пищевые и молочные продукты; избыток соли ингибирует рост большинства бактерий, кроме стафилококков.

Назначение

Основа агара с маннитом и солью HiMedia M118-100G рекомендована для выделения патогенных стафилококков из клинических и не клинических образцов.

Тип образцов:

• Клинические образцы: гной, моча и другие.
• Пищевые и молочные образцы.

Технические характеристики

Состав

Содержание компонентов приведено в расчёте на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является хорошо изученным условно-патогенным микроорганизмом человека.

Способность свёртывать плазму продолжает оставаться широко используемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Стафилококки обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на маннитно-солевом агаре с феноловым красным и добавлением 7,5 % NaCl используется для анализа косметики, молока, пищевых продуктов и других образцов.

Дополнительное свойство Staphylococcus aureus — липазная активность — выявляется после добавления эмульсии яичного желтка FD045. Липазная активность визуализируется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Пептон HM B и протеозный пептон обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия действует как ингибирующий компонент по отношению к бактериям, отличным от стафилококков. Маннит является сбраживаемым углеводом: его ферментация приводит к образованию кислоты, которая обнаруживается индикатором феноловым красным.

S. aureus ферментирует маннит, образуя жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит, поэтому формируют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами. Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста в пробирке или на предметном стекле.

Липазную активность S. aureus выявляют путём добавления в среду эмульсии яичного желтка.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин; давление — 15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам. Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно действующим лабораторным инструкциям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения и подтверждение результатов

1. Предположительно обнаруженный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избыток соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования, например на питательный бульон M002.
3. Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать замедленную ферментацию маннита. Поэтому отрицательные результаты необходимо повторно инкубировать ещё 24 ч перед окончательным признанием результата отрицательным.
4. Для подтверждения необходимо выполнять биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Ёмкость: плотно закрытая.
• Условия хранения: сухое, проветриваемое место, защищённое от яркого света, экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом месте, плотно закрыв флакон.
• После использования: плотно закрывать ёмкость для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Продукт содержит 7,5 % хлорида натрия. При неоднократном воздействии воздуха и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки. Неправильное хранение также может привести к комкованию. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция среды

Реакция 11,1 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принят равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.