Агар для выделения геморрагических E.coli HiMedia M1158-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Агар для выделения геморрагических E.coli HiMedia M1158-500G (уп/500 гр) предназначена для выделения и подсчёта энтерогеморрагических Escherichia coli, фасовка — 500 г. Агар применяют для анализа клинических образцов и пищевых продуктов с использованием фермент-меченого моноклонального антитела; продукт предназначен только для профессионального применения и диагностики in vitro.

Назначение

Агар Hemorrhagic Coli (HC) рекомендован для выделения и подсчёта Escherichia coli с использованием фермент-меченого моноклонального антитела. Методика применяется для энтерогеморрагических штаммов Escherichia coli, включая Escherichia coli O157:H7.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Регистрационные сведения: ФСЗ 2009/03709
• Производитель: HiMedia
• Фасовка: 500 г

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Геморрагический колит — разновидность гастроэнтерита, при которой определённые штаммы бактерии Escherichia coli инфицируют толстый кишечник и вырабатывают токсин, вызывающий кровянистую диарею и другие тяжёлые осложнения. Escherichia coli O157:H7 была идентифицирована как возбудитель геморрагического колита. Вспышки заболевания могут быть связаны с употреблением недостаточно термически обработанной говядины, особенно мясного фарша, а также непастеризованного молока или сока.

Агар HC используют для выделения и подсчёта Escherichia coli — основного штамма, вызывающего геморрагический колит.

• Триптон служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Escherichia coli O157:H7 не ферментирует сорбитол и образует бесцветные колонии.
• Бромкрезоловый пурпурный выполняет функцию индикатора pH.
• Желчные соли подавляют сопутствующие грамположительные бактерии.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 61,13 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки образцов и проведения анализа

1. Гомогенизируйте 10 г исследуемого образца в 90 мл пептонной воды M028. Если ожидается высокое содержание микроорганизмов, приготовьте разведения 1:100.
2. Отберите пипеткой аликвоты объёмом 1 мл через одноразовый предварительный фильтр с размером пор 100 мкм.
3. Внесите аликвоты в 10 мл пептонной воды M028, профильтрованной через гидрофобные мембранные фильтры с координатной сеткой (HGMF).
4. Перенесите фильтры на поверхность агара Hemorrhagic Coli (HC).
5. Инкубируйте фильтры при 43 °C в течение 16–20 ч.
6. С помощью репликатора HGMF перенесите выросшие колонии на другие фильтры HGMF.
7. Инкубируйте реплики на агаре HC при 43 °C в течение 16–20 ч.
8. Проведите исследование исходных фильтров с использованием конъюгированного антитела.

Типы образцов

• Клинические образцы: кал, ректальные мазки и другие образцы.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы сбора и обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Для получения сведений по безопасности используйте соответствующие паспорта безопасности.

Эксплуатационные характеристики и ограничения

• Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на среде.
• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом требований пользователя.
• Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель пурпурного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 6,11 % (масс./об.) при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

7,00–7,40.