Агар для выделения геморрагических E.coli HiMedia M1158-500G (уп/500 гр)

Дифференциальный агар для выделения геморрагических E. coli HiMedia M1158-500G (производство: HiMedia) предназначен для изоляции и подсчета энтерогеморрагических штаммов Escherichia coli. Среда используется для анализа клинических образцов (кал, ректальные мазки) и пищевых продуктов; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Геморрагический колит вызывается определенными штаммами Escherichia coli (в частности, E. coli O157:H7), которые поражают толстый кишечник и вырабатывают токсин, приводящий к кровавой диарее.

Принцип работы среды основан на следующем:

• Триптон: источник углерода, азота, витаминов и минералов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Сорбитол: дифференцирующий компонент. Штаммы E. coli O157:H7 не ферментируют сорбитол, в результате чего образуют бесцветные колонии.
• Бромкрезоловый пурпурный: служит индикатором pH.
• Желчные соли: подавляют рост сопутствующих грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

1. Гомогенизируйте 10 г исследуемого образца в 90 мл пептонной воды (M028). При ожидаемом высоком содержании микроорганизмов приготовьте разведения 1:100.
2. Перенесите аликвоты по 1 мл через одноразовый фильтр с порами 100 мкм в 10 мл пептонной воды (M028), предварительно профильтрованной через гидрофобные сеточные мембранные фильтры (HGMF).
3. Поместите фильтры на поверхность агара Hemorrhagic Coli (HC) и инкубируйте при 43 °C в течение 16–20 часов.
4. Перенесите рост колоний на другие HGMF с помощью репликатора.
5. Инкубируйте реплики на HC-агаре при 43 °C в течение 16–20 часов, а оригинальные фильтры протестируйте с помощью конъюгированных антител.

Приготовление среды

1. Растворите 61,13 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 43 °C в течение 16–20 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и предупреждения

• Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность на данной среде.
• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.