Сахарозный агар для выделения V.parahaemolyticus HiMedia M1153-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Сахарозный агар для выделения V.parahaemolyticus HiMedia M1153-500G (уп/500 гр) — сухой порошок для приготовления агара. Среда предназначена для выделения и количественного определения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов; готовую среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Сахарозный агар Vibrio parahaemolyticus (VPSA) применяют для выделения и количественного определения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов в соответствии с методическими рекомендациями APHA. Среда используется на заключительных этапах количественного определения методом гидрофобной сеточной мембранной фильтрации (HGMF).

Vibrio parahaemolyticus — галофильный эстуарный микроорганизм, который может присутствовать в различных морепродуктах и морской среде. В свежих морепродуктах микроорганизм обычно обнаруживается в небольшом количестве — менее 100/г — и чувствителен к охлаждению и нагреванию.

Принцип действия и интерпретация

VPSA является дифференциальной средой с частичной селективностью, позволяющей отличать Vibrio parahaemolyticus от других морских видов рода Vibrio.

• Триптоза, ферментативный гидролизат казеина и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизм необходимыми азотистыми соединениями, факторами роста и витаминами группы B.
• Сахароза служит сбраживаемым углеводом.
• Бромтимоловый синий используется как индикатор pH.
• Смесь желчных солей подавляет рост контаминирующих грамположительных бактерий.
• Повышенное содержание хлорида натрия и щелочное значение pH создают условия для выделения Vibrio.
• Vibrio parahaemolyticus не сбраживает сахарозу и образует сине-зелёные колонии, что позволяет отличать его от других видов Vibrio, сбраживающих сахарозу.

Состав

Формула на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 8,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 73,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Тщательно перемешайте.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика выделения и количественного определения

1. Разведите исследуемую пробу морепродукта и гомогенизируйте её со стерильным пептонно-твин-солевым разбавителем.
2. Проведите фильтрацию через гидрофобную сеточную мембрану (HGMF), используя стерильный разбавитель в качестве носителя.
3. Перенесите HGMF в асептических условиях на чашку со средой «триптиказо-соевый солевой агар с сульфатом магния» (TSAMS, M990).
4. Инкубируйте HGMF на TSAMS в течение 4 ч при 35 °C.
5. Перенесите HGMF со среды TSAMS на сухую чашку с сахарозным агаром для Vibrio parahaemolyticus (VPSA, M1153).
6. Инкубируйте чашку с VPSA в течение 18–20 ч при 42 °C.
7. Оцените рост и цвет колоний в соответствии с культуральными характеристиками среды.

Контроль качества

Внешний вид порошка: однородный, легкосыпучий порошок от светло-жёлтого до бледно-зелёного цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель синего цвета.

Реакция: реакция 7,35%-ного водного раствора при 25 °C; pH 8,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 42 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Наименование среды: сахарозный агар для Vibrio parahaemolyticus (VPSA)
• Артикул: M1153-500G
• Тип питательной среды: диагностический
• Тип продукта: стандартный
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Фасовка: 500 г
• Диапазон pH: 8,40–8,80
• Конечный pH при 25 °C: 8,6 ± 0,2
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Назначение изделия: агар

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Методические документы

Среда предназначена для применения в соответствии с методическими рекомендациями APHA по микробиологическому исследованию пищевых продуктов. В российской практике назначение среды также указано для работы по методическим рекомендациям Роспотребнадзора МР 02.009-06.Саратов.2006.

Отличительная особенность VPSA — сочетание повышенной концентрации соли, щелочного pH, смеси желчных солей и индикатора бромтимолового синего для дифференциации несбраживающего сахарозу Vibrio parahaemolyticus по сине-зелёным колониям.

Документы и идентификация

• Производитель: HiMedia
• Регистрационный документ: ФСЗ 2009/03709