Основа бульона Вэсли HiMedia M1152-500G (уп/500 гр)

Порошкообразная питательная среда «Основа бульона Вэсли HiMedia M1152-500G (уп/500 гр)» предназначена для приготовления 500 г основы селективной обогатительной среды. Среда применяется для выделения Campylobacter jejuni из продуктов птицеводства и требует добавления селективной добавки FD077 и щелочного раствора гематина.

Назначение и область применения

Основа бульона Вэсли используется для селективного обогащения и последующего выделения Campylobacter jejuni из продуктов птицеводства. Методика рекомендована APHA.

Селективное обогащение необходимо для выявления небольшого количества жизнеспособных клеток C. jejuni, которые могут присутствовать в пищевых продуктах. Обогащённую культуру затем высевают на селективные питательные среды.

Состав

Количество компонентов для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Campylobacter jejuni — грамотрицательная изогнутая палочковидная бактерия, обычно встречающаяся в кишечнике птицы, крупного рогатого скота, свиней, грызунов, диких птиц, кошек и собак.

• C. jejuni* является одной из основных причин острого бактериального гастроэнтерита у человека при употреблении продуктов животного происхождения. У пациентов с диареей C. jejuni выделяется чаще, чем виды рода Salmonella.

Микроорганизм не растёт при температуре ниже 30 °C и чувствителен к обычной концентрации кислорода в атмосфере. Поэтому в пищевых продуктах может присутствовать небольшое количество клеток Campylobacter. Селективное обогащение позволяет выявить небольшое количество культивируемых клеток C. jejuni.

• C. jejuni* лучше сохраняется в продуктах, хранящихся при температуре охлаждения, но высокочувствителен к замораживанию и также чувствителен к хлориду натрия. Бульон Вэсли приготовлен по рецептуре, описанной Wesley, и рекомендован APHA для селективного обогащения C. jejuni из продуктов птицеводства.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые питательные вещества, витамины группы B и другие факторы роста;
• метабисульфит натрия и сульфат железа способствуют выживанию и восстановлению микроорганизма;
• пируват натрия повышает устойчивость C. jejuni к кислороду;
• небольшое количество агара способствует созданию микроаэрофильной атмосферы;
• бицин обеспечивает высокую буферную ёмкость среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 39,25 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки для кампилобактеров FD077.
6. Добавьте 6,25 мл охлаждённого щелочного раствора гематина. Раствор гематина готовят растворением 32 мг бычьего гемина в 10 мл раствора NaOH концентрацией 0,15 N.
7. Стерилизуйте приготовленную среду в автоклаве при давлении 5 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,034 МПа, при 108 °C в течение 30 мин.
8. Тщательно перемешайте среду перед разливом.

Методика обогащения и выделения

1. Инокулируйте 90 или 100 мл бульона Вэсли соответственно 10 или 25 г пищевого продукта.
2. Инкубируйте среду при 42 °C в течение 16–18 ч с перемешиванием в микроаэробной атмосфере.
3. Высейте обогащённую культуру на селективную питательную среду.
4. Инкубируйте посевы при 42 °C до 48 ч в микроаэробных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный легко сыпучий порошок.

Гелеобразование

Полужидкая среда, сопоставимая с гелем 0,1 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор янтарного цвета.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации при 42 °C в течение 16–24 ч с добавлением селективной добавки для кампилобактеров FD077 и щелочного раствора гематина в микроаэробной атмосфере.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Комплект поставки

• Основа бульона Вэсли HiMedia M1152-500G, упаковка 500 г.

Реагенты и совместимые добавки

По заявке поставляется:

• FD077 — селективная добавка для кампилобактеров.

Для приготовления среды также используется щелочной раствор гематина, приготовленный из 32 мг бычьего гемина и 10 мл раствора NaOH концентрацией 0,15 N.