Цистин-лактоза-эдектролит-дефицитный агар без индикатора HiMedia M1146-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Цистин-лактоза-эдектролит-дефицитный агар без индикатора HiMedia M1146-500G (уп/500 гр) — порошковая основа агара для приготовления селективной среды с конечным pH 7,3 ± 0,2. Среда предназначена для выделения, количественного определения и предварительной идентификации бактериальной флоры мочевых путей; ограничение применения — Shigella может не расти, а инкубация свыше 24 ч может маскировать нелактозосбраживающие микроорганизмы.

Назначение и область применения

Цистин-лактоза-эдектролит-дефицитный агар (C.L.E.D.) без индикатора предназначен для:

• выделения бактериальной флоры мочевых путей;
• количественного определения бактерий;
• предварительной идентификации бактерий;
• бактериологических исследований мочи;
• процедур с использованием тест-полосок;
• транспортирования образцов мочи в качестве среды для дип-инокулации.

Тип клинического образца: моча.

Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
Назначение изделия: агар.

Состав

Формула на 1 л среды:

* Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности. HM Peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

На твёрдой питательной среде ограничение содержания электролитов позволяет контролировать роение видов Proteus. В ранних вариантах среды для подавления роения Proteus применяли спирт, поверхностно-активные вещества, азид натрия, борную кислоту и другие компоненты.

Позднее среду Сэндиса модифицировали Макки и Сэндис: маннит заменили лактозой и сахарозой, а также увеличили концентрацию агара и бромтимолового синего. В дальнейшей модификации сахарозу исключили, а в состав включили L-цистин для стимуляции роста карликовых колоний колиформных бактерий, зависимых от цистина. Полученная формула получила название C.L.E.D. — цистин-лактозная электролит-дефицитная среда.

По сравнению с ранними вариантами среды формула C.L.E.D. характеризуется исключением сахарозы и включением L-цистина; ограничение электролитов используется для контроля роения Proteus.

Функции компонентов:

• пептон, HM Peptone B и триптон обеспечивают источники азота и углерода, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые для роста питательные вещества;
• лактоза является сбраживаемым сахаром;
• L-цистин поддерживает рост карликовых колоний колиформных бактерий;
• бромтимоловый синий является индикатором pH и приобретает жёлтую окраску при кислой реакции среды.

Бактериурию можно количественно оценивать посевом на поверхность агара после соответствующего разведения образца. Среду следует инокулировать сразу после сбора мочи. Допускается инокуляция калиброванной петлёй или методом заливных чашек с использованием дублирующих разведений.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,1 г порошка в 998 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки бромтимолового синего FD091.
3. Нагрейте среду до кипения для полного растворения.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов силы на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для получения окрашенной приготовленной среды добавка бромтимолового синего FD091 должна быть внесена в соответствии с приведённой процедурой.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

Инокулируйте среду непосредственно после сбора мочи. Низкое количество бактерий в образце может быть связано с предварительной антибиотикотерапией или низким pH мочи.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среда рекомендована для исследования инфекций мочевых путей. Низкое количество бактерий в моче может быть результатом антибиотикотерапии или низкого pH мочи.
2. Выделение микроорганизмов зависит от их количества в моче.
3. Среду необходимо инокулировать сразу после сбора мочи.
4. Виды Shigella могут не расти на этой среде.
5. Для получения корректных результатов среду не следует инкубировать более 24 ч. При преобладании лактозосбраживающих микроорганизмов вся среда может пожелтеть, что маскирует наличие нелактозосбраживающих микроорганизмов.

Технические характеристики

Внешний вид и свойства

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: при добавлении бромтимолового синего FD091 в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 3,61 % (м/о) при 25 °C.
• pH: 7,10–7,50.
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч на среде с добавлением бромтимолового синего FD091.

Контроль качества и оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при соблюдении инструкции, указанной на этикетке, использовании продукта до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• Для сохранения заявленных свойств использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Только