Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia M1145-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia M1145-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia для выделения видов Listeria из патологического материала, с конечным значением pH 7,0 ± 0,2. Применяется для анализа клинических, пищевых и молочных образцов; после приготовления среду стерилизуют автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин и дополняют селективной добавкой.

Назначение

Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia M1145-500G предназначена для выделения видов Listeria из патологических образцов, а также из клинического материала, пищевых и молочных продуктов.

• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Форма выпуска: 500 г
• Применение: выделение и предварительная дифференциация Listeria методом посева на селективную среду

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечное значение pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Реакция 5,55 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — единственный вид рода Listeria, имеющий существенное значение как патоген человека. Listeria seeligeri, Listeria welshimeri и Listeria ivanovii связаны с заболеваниями животных. Все виды Listeria могут быть патогенны для овец и крупного рогатого скота.

Положительная диагностика листериоза возможна только после выделения и культивирования возбудителя из образцов крови или спинномозговой жидкости поражённых организмов.

Основа среды Listeria Oxford разработана на основе рецептуры, описанной Curtis и соавторами, для выделения L. monocytogenes из клинических и пищевых образцов.

• Специальный пептон служит источником необходимых питательных веществ.
• Кукурузный крахмал нейтрализует образующиеся токсичные метаболиты.
• Хлорид лития и антибиотики подавляют грамотрицательные бактерии и большинство грамположительных организмов; отдельные штаммы стафилококков могут расти в виде колоний, отрицательных по гидролизу эскулина.
• Циклогексимид снижает грибковую контаминацию.
• Цефотетан и фосфомицин подавляют избыточный рост бактерий.
• Акрифлавин, сульфат колистина и хлорид лития подавляют бактерии, не относящиеся к видам Listeria.
• Селективная добавка CM (FD126) может использоваться альтернативно; она подавляет как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии.

L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с ионами железа, в результате чего вокруг колоний образуются чёрные зоны.

Селективность среды достаточна для выделения и дифференциации микроорганизмов при прямом поверхностном посеве. Для загрязнённых образцов рекомендуется предварительно разводить инокулят; при высокой степени загрязнения предварительное разведение особенно необходимо.

Методика выделения зависит от исследуемого материала. Для всех типов образцов рекомендуется селективное и холодовое обогащение.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 27,75 г порошка и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа или 1,03 бар).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки Oxford (FD071) или одного флакона селективной добавки CM (FD126).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и выделение Listeria

Фекальные и биологические образцы

1. Гомогенизируйте образец в 0,1%-ной пептонной воде (M028).
2. Отберите 0,1 мл подготовленного материала.
3. Нанесите образец непосредственно на селективную среду для Listeria или внесите его в бульон селективного обогащения.
4. Инкубируйте посевы при 30 °C в течение 7 суток.
5. После инкубации повторно внесите материал на селективную среду для Listeria.

Пищевые и образцы окружающей среды

Для пищевых и образцов окружающей среды обычно применяют селективное обогащение.

Пищевые продукты, молоко и молочные продукты

1. Добавьте 25 мл или 25 г образца к 225 мл бульона обогащения для Listeria UVM (M890A).
2. Тщательно гомогенизируйте и перемешайте.
3. Инкубируйте в течение 48 ч при 30 °C.
4. Выполните штриховой посев обогащённой культуры на основу среды Listeria Oxford.
5. Инкубируйте в аэробных условиях в течение 48 ч при 37 °C.
6. Отберите 5 типичных колоний, положительных по гидролизу эскулина.
7. Перенесите колонии на среду для переваривания соево-казеинового гидролизата (M290).
8. Инкубируйте в течение 24 ч.
9. Используйте полученные колонии для биохимического подтверждения.

Типы образцов

• Клинические образцы: ткани и биологические жидкости
• Пищевые и молочные образцы

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым лабораторным процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко пересыпающийся порошок от светло-жёлтого до тёмно-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-янтарного цвета с голубоватым оттенком.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки Oxford (FD071) или CM (FD126) и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

** Bacillus spizizenii ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1145-500G
• Тип питательной среды: элективная
• Назначение: основа Оксфордской среды для листерий
• Рабочее значение pH: 7,0 ± 0,2 при 25 °C
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения порошка: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Требования к упаковке: хранить в плотно закрытой ёмкости
• Условия помещения: сухое, проветриваемое место
• Защита при хранении: не допускать воздействия