HiMedia M1145-100G Основа среды Листерия Оксфорд

Сухая питательная среда HiMedia M1145-100G Основа среды Листерия Оксфорд для изоляции видов Listeria из патологических образцов. Применяется для выделения L. monocytogenes из клинических, пищевых и молочных проб; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на рецептуре Кертиса и др. Специальный пептон служит источником необходимых питательных веществ. Кукурузный крахмал нейтрализует образующиеся токсичные метаболиты. Хлорид лития и антибиотики подавляют рост грамотрицательных бактерий и большинства грамположительных микроорганизмов (хотя некоторые штаммы Staphylococci могут расти в виде эскулиноотрицательных колоний). Циклогексимид снижает контаминацию грибами; цефотетан и фосфомицин ингибируют избыточный бактериальный рост. Акрифлавин, сульфат колистина и хлорид лития подавляют бактерии, отличные от видов Listeria.

L. monocytogenes гидролизует эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с ионами железа, образуя чёрные зоны вокруг колоний.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и в асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки Oxford (FD071) или 1 флакона селективной добавки CM (FD126).
5. Тщательно перемешайте перед розливом в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа по типу образца

• Фекальные и биологические образцы: образец гомогенизируют в 0,1 % пептонной воде (M028). 0,1 мл пробы либо напрямую высевают на селективную среду для Listeria, либо инокулируют в селективный обогатительный бульон с инкубацией при 30 °C в течение 7 дней, после чего делают пересев на селективную среду.
• Пищевые и экологические образцы (молоко и молочные продукты): 25 мл или 25 г образца добавляют к 225 мл обогатительного бульона для Listeria UVM (M890A). После гомогенизации инкубируют 48 часов при 30 °C. Обогащенные культуры высевают штрихом на основу среды Листерия Оксфорд и инкубируют аэробно 48 часов при 37 °C.
• Подтверждение: 5 типичных (эскулиноположительных) колоний инокулируют в соево-казеиновый дигест (M290), инкубируют 24 часа и проводят биохимическую идентификацию.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Контроль качества

• Внешний вид: гомогенный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до тёмно-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: тёмно-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 6,80–7,20 (водный раствор 5,55 % мас./об. при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением селективной добавки Oxford (FD071) или CM (FD126) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для использования в качестве In Vitro диагностики профессионалами.

• Типы образцов: ткани и жидкости организма, пищевые и молочные продукты.
• Ограничения: индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту. Для окончательной идентификации изолированных микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом месте, вдали от источников воспламенения.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.