HiMedia M1139I-500G Селективная основа агара для Bacillus cereus (MYP)

Селективная основа агара для Bacillus cereus (MYP) HiMedia M1139I-500G предназначена для изоляции и идентификации видов Bacillus и патогенных стафилококков. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 7932:2004/Amd 1:2020 и ISO 11133:2014 (E) & Amd:2020.

Принцип измерения

Среда позволяет дифференцировать B. cereus от других бактерий на основании активности лецитиназы, ферментации маннитола и устойчивости к полимиксину B.

• Источники азота: триптон и пептон HM B.
• Индикатор ферментации: феноловый красный определяет ферментацию маннитола; при производстве кислоты колонии приобретают жёлтый цвет.
• Дифференциация по лецитиназе: добавка эмульсии яичного желтка позволяет выявить колонии, продуцирующие лецитиназу, которые окружаются зоной белого осадка.
• Селективность: сульфат полимиксина B ограничивает рост грамотрицательных бактерий, таких как Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

B. cereus не ферментирует маннит и обладает слабой способностью к споруляции. Типичные колонии B. cereus имеют форму бацилл с красноватыми зонами и белыми ореолами.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендировать 46,03 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое 2 флаконов стерильного селективного дополнения PolyB (FD003) и 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Посев и инкубация

1. Подготовить пробу в соответствии с международным стандартом для конкретного продукта.
2. Быстро распределить инокулят по поверхности агара, не касаясь стенок чашки шпателем.
3. Перевернуть чашки и инкубировать при 30 °C в течение 18–24 ч.
4. Если колонии не видны отчетливо, продлить инкубацию еще на 24 ч.
5. Интерпретация: предполагаемые колонии B. cereus крупные, розовые (отсутствие ферментации маннитола) и обычно окружены зоной осадка (продукция лецитиназы).

Подтверждение

Выбранные колонии пересевают штрихом, точечно или путем погружения на поверхность агара с кровью овцы для анализа реакции гемолиза. Инкубируют при 30 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.

Технические характеристики

Состав (ISO specifications: MYP)

• Сульфат полимиксина B: 50 000 ед.
• Эмульсия яичного желтка: 100,00 мл
• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Состав (Bacillus cereus Selective Agar Base MYP ISO 7932)

• Добавка FD003: 2 флакона
• Селективное дополнение PolyB: сульфат полимиксина B 50 000 ед.
• Эмульсия яичного желтка (FD045): 100 мл
• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розово-пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления эмульсии яичного желтка (FD045) — светло-оранжевый непрозрачный гель.
• Реакция 4,6 % (масс/об) водного раствора при 25 °C: pH 7,2 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,0–7,40.
• Происхождение компонентов: животное.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: ПНД (HDPE).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении эмульсии яичного желтка (FD045) и селективного дополнения PolyB (FD003) после инкубации при 30 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3...44 $\pm$ 4 ч.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа пищевых продуктов и кормов для животных.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, требует плотного закрытия крышки для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

• Индивидуальные организмы могут проявлять вариативность в требованиях к росту и паттернах развития на данной среде.
• Рекомендуется валидация среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• При возникновении сомнений в истинности реакции рекомендуется перенос подозрительных колоний на свежую среду.
• При работе с образцами и культурами соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация

Утилизация использованных или непригодных препаратов должна осуществляться путем автоклавирования и/или инсинерации в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.