Основа модифицированного MYP агара для бацилл HiMedia M1139-500G (уп/500 гр) — сухая порошкообразная питательная среда для выделения и идентификации видов Bacillus и патогенных стафилококков, с конечным pH 7,1 ± 0,2. Основа применяется для анализа клинических, пищевых и водных образцов, а дифференциация микроорганизмов основана на активности лецитиназы, ферментации маннита и устойчивости к полимиксину.

Назначение

Основа модифицированного MYP агара рекомендована для выделения и идентификации видов Bacillus и патогенных стафилококков.

Тип образца:

• Клинические образцы: поражения кожи, респираторные выделения.
• Пищевые образцы.
• Водные образцы.

Изделие предназначено для диагностики in vitro и профессионального применения.

Технические характеристики

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. HM-экстракт эквивалентен мясному экстракту.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 43,02 г порошка в 900 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа (≈1,03 бар), при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 2 флаконов стерильной добавки PolyB Selective Supplement (FD003) до конечной концентрации 100 ед./мл.
6. Добавьте 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) на 1000 мл среды.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Bacillus cereus широко распространён в почве, растительности, воде и пыли. Микроорганизм выделяли из различных пищевых продуктов, включая овощи, мясо, зерновые, пастеризованное свежее молоко, сухое молоко и переработанные пищевые продукты.

При благоприятных условиях Bacillus cereus размножается и вызывает желудочно-кишечные заболевания. Микроорганизм связан с двумя формами пищевого отравления: рвотной и диарейной. Рвотная форма опосредована высокостабильным токсином, сохраняющим активность при высокой температуре, воздействии трипсина, пепсина и экстремальных значениях pH. Диарейная форма опосредована энтеротоксином, лабильным к воздействию температуры и кислот.

Активность лецитиназы является ключевой реакцией для дифференциальной идентификации B. cereus — наиболее часто встречающегося и клинически значимого вида среди большинства других видов Bacillus. При положительной реакции на лецитиназу предварительную идентификацию Bacillus cereus проводят также по морфологии колоний, гемолитической активности и результатам тестов на подвижность.

При наличии в значительном количестве в некоторых пищевых продуктах B. cereus способен образовывать метаболиты, вызывающие клинические симптомы пищевого отравления. Модифицированный MYP-агар дифференцирует B. cereus от других бактерий по активности лецитиназы, ферментации маннита и устойчивости к полимиксину, содержащемуся в добавке FD003. Модифицированный MYP-агар имеет состав, аналогичный MYP-агару, за исключением концентрации агара.

Основа модифицированного MYP агара содержит пептон и HM-экстракт, обеспечивающие источник азота и углерода, аминокислоты с длинной цепью, витамины и другие необходимые питательные вещества для роста.

Ферментацию маннита выявляют с помощью фенолового красного: в результате образования кислоты колонии, ферментирующие маннит, окрашиваются в жёлтый цвет. Добавленная эмульсия яичного желтка способствует дифференциации колоний, продуцирующих лецитиназу; такие колонии окружены зоной белого преципитата.

Добавление селективной добавки PolyB Selective Supplement (FD003) ограничивает рост грамотрицательных бактерий, включая Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa. Дифференциальные свойства среды позволяют отличать B. cereus от других видов Bacillus по неспособности ферментировать маннит и слабому спорообразованию.

B. cereus расщепляет компоненты яичного желтка и образует типичные колонии бациллярной формы с красноватыми зонами и белыми ореолами. Кислота, образуемая микроорганизмами, отличными от B. cereus, может диффундировать в среду, затрудняя различение ферментирующих и неферментирующих маннит микроорганизмов. Поэтому подозрительные колонии рекомендуется перенести на свежую среду для визуализации истинной реакции.

Колонии, выращенные на основе модифицированного MYP агара, субкультивируют на питательном агаре и инкубируют при 30 °C в течение 24 ч для наблюдения или определения вегетативных клеток, спорангиев, морфологии спор и липидных глобул внутри вегетативных клеток.

Модифицированный MYP-агар ранее также обозначался как среда для Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка (FD045) и селективной добавки PolyB Selective Supplement (FD003), после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розовато-фиолетового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка (FD045): в чашках Петри образуется непрозрачный гель светло-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,3 % масс./об. при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

6,90–7,30.

Пробоподготовка, сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. При