Основа колумбийского кровяного агара с гемином HiMedia M1133-500G (уп/500 гр)

Основа колумбийского кровяного агара с гемином HiMedia M1133-500G (уп/500 г) представляет собой обогащенную базовую среду для приготовления шоколадного агара, кровяного агара, а также различных селективных и идентификационных сред. Применяется для культивирования требовательных микроорганизмов из клинических образцов; содержит гемин для стимуляции роста привередливых бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Основа колумбийского агара используется для создания сред с добавлением крови или селективных сред с антимикробными добавками. Добавление овечьей крови позволяет выявлять гемолитические реакции и обеспечивает X-фактор (гемин), необходимый для роста многих видов бактерий. Однако среда не содержит V-фактор (никотинамидадениндинуклеотид), так как содержащаяся в крови NAD-аза разрушает NAD; вследствие этого Haemophilus influenzae, требующий обоих факторов (X и V), на данной среде не растет.

Добавление бацитрацина делает обогащенную среду селективной для изоляции видов Haemophilus из клинических образцов, особенно из верхних дыхательных путей. Комбинация триптона, пептона и пептона HM B обеспечивает высокие ростовые свойства. Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты.

Особенности интерпретации:

• Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз. Требуется проведение подтверждающих тестов всех предполагаемых колоний.
• При добавлении стерильной сыворотки среда эффективно используется для теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae (линии преципитации токсина-антитоксина становятся видимыми через 48 часов).

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 44,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Варианты модификации среды

• Кровяной агар: к стерильной охлажденной базе добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы.
• Шоколадный агар: к стерильной охлажденной базе добавьте 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы. Нагрейте до 80 °C в течение 10 минут при постоянном перемешивании.
• Селективные среды: в стерильную базу добавляют антимикробные агенты:
  • Для видов Brucella: 1 ампула селективной добавки NPBCVN (FD005) на 500 мл стерильной расплавленной базы.
  • Для видов Campylobacter: 1 ампула добавки Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106) совместно с 1 ампулой минеральной добавки Minerals Growth Supplement (FD009) на 500 мл стерильной расплавленной базы.
  • Для видов Gardnerella: 1 ампула селективной добавки GNA (FD056) на 500 мл стерильной расплавленной базы.
  • Для кокков: 1 ампула добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) на 500 мл стерильной расплавленной базы.

Условия эксплуатации и инкубации

• Многие патогены требуют CO₂; в таких случаях чашки инкубируют в атмосфере с содержанием CO₂ примерно 3–10 %.
• Виды Campylobacter лучше всего растут при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Среды с добавками для Gardnerella инкубируют при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере с 7 % CO₂.
• Культуры Brucella высокоинфекционны; инкубация проводится в атмосфере 5–10 % CO₂.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель. При отстаивании расплавленной среды наблюдается помутнение.
  • После добавления 5 % стерильной дефибринированной крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 4,4 % водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Тип образцов: клинические образцы, содержащие аэробные организмы.

Ограничения:

1. Для обеспечения максимальной селективности приготовленные supplemented-планшеты (с добавками) следует использовать в течение 18 часов после приготовления.
2. Для подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Хранение и утилизация

• Хранение: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.