Агар для определения хламидоспор HiMedia M113-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда Агар для определения хламидоспор HiMedia M113-500G (уп/500 гр) — порошковая среда с конечным значением pH 5,1 ± 0,2. Среда предназначена для дифференциации Candida albicans от других видов Candida по образованию хламидоспор; температура инкубации не должна превышать 25 °C.

Назначение

Агаровую среду применяют для изучения штаммов Candida spp. и выделения Candida albicans среди других дрожжевых грибов по образованию хламидоспор.

Среда приготовлена по прописи Nickerson и Mankowski и предназначена для дифференциации Candida albicans от других видов Candida на основании формирования хламидоспор. Рост хламидоспор наблюдали у 2 из 3 штаммов C. albicans и у штамма C. dubliniensis. В тех же условиях хламидоспоры могут образовывать грибы вида Candida stellatoidea, поэтому для точной идентификации требуются дополнительные тесты.

Дополнительные критерии идентификации:

• форма бластоспор;
• тип филаментации;
• ферментация сахаров;
• восстановление индикатора.

Краситель в составе среды окрашивает хламидоспоры в синий или голубоватый цвет, что облегчает микроскопическое исследование. Биотин и полисахарид служат факторами роста и стимулируют образование хламидоспор. Фосфат калия обеспечивает буферность среды. Обильную филаментацию различных типов роста наблюдали у всех изученных штаммов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Candida albicans — диплоидный половой гриб, относящийся к дрожжам, и возбудитель оппортунистических инфекций полости рта и влагалища у человека. C. albicans является комменсалом кожи, желудочно-кишечного и мочеполового трактов. При определённых условиях чрезмерный рост C. albicans может приводить к развитию орофарингеального кандидоза, вульвовагинального кандидоза и кандидемии.

Формирование хламидоспор является наиболее дифференцирующим признаком C. albicans. Агар для определения хламидоспор разработан для дифференциации C. albicans от других видов по образованию хламидоспор и приготовлен по формуле Nickerson и Mankowski.

Функции компонентов среды:

• сульфат аммония служит источником ионов, стимулирующих метаболизм;
• фосфат монокалия обеспечивает буферность среды;
• биотин обеспечивает витамины, необходимые для метаболизма;
• очищенный полисахарид служит источником углерода;
• трипановый синий является витальным красителем, избирательно поглощается хламидоспорами и окрашивает их в синий цвет, тогда как филаменты остаются бесцветными.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,1 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi, что соответствует приблизительно 0,10 МПа, при температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика определения хламидоспор

1. Стерильной иглой нанесите на поверхность агара штриховку в виде буквы X, используя посевной материал.
2. Асептически разместите на поверхности агара покровное стекло, предварительно обработанное пламенем спирта и охлаждённое. Покровное стекло должно располагаться над пересечением линий, образующих X.
3. Инкубируйте чашки при температуре 20–25 °C в течение 2–6 суток.
4. Исследуйте чашки под малым увеличением микроскопа.

Температура не должна превышать 25 °C, поскольку более высокая температура препятствует образованию хламидоспор.

После инкубации большинство штаммов C. albicans и C. stellatoidea формируют типичные хламидоспоры. Хламидоспоры наблюдаются вдоль края покровного стекла; они имеют округлую форму, толстую стенку, синюю окраску и располагаются на терминальных концах гиф.

Некоторые штаммы C. albicans после многократных пересевов могут утрачивать способность образовывать хламидоспоры.

Типы образцов

• пищевые образцы;
• образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до синего цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель синего цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,71 % при 25 °C.

• pH: 5,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 4,90–5,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при температуре 20–25 °C в течение 2–6 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Дополнительные характеристики:

• Тип питательной среды: элективная.
• Назначение изделия: агар.
• Конечное значение pH при 25 °C: 5,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 4,90–5,30.
• Концентрация при приготовлении: 37,1 г/1000 мл, или 3,71 % м/о.
• Форма готовой среды: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровом гелем.
• Цвет порошка: от кремового до синего.
• Цвет готовой среды: синий.
• Прозрачность готовой среды: непрозрачная.
• Форма выпуска: непрозрачный водоотталкивающий пластиковый флакон с навинчивающимся колпачком и внутренней крышкой.
• Масса упаковки: 0,5 кг.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Регистрация: зарегистрировано в Росздравнадзоре Российской Федерации.
• Этикетка: на русском языке, содержит инструкцию по применению.

Условия хранения и срок годности

Сухой продукт