HiMedia M113-100G Агар для хламидоспор

Сухая питательная агаризованная среда HiMedia M113-100G Агар для хламидоспор предназначена для дифференциации Candida albicans и других видов Candida по способности образовывать хламидоспоры. Среда применяется для анализа пищевых продуктов и воды; температура инкубации не должна превышать 25 °C, поскольку более высокая температура препятствует образованию хламидоспор.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации Candida albicans от других видов Candida на основании образования хламидоспор.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Происхождение и форма

Принцип действия и интерпретация

Candida albicans — диплоидный половой гриб, представляющий собой форму дрожжей и являющийся возбудителем оппортунистических инфекций полости рта и влагалища у человека. C. albicans относится к нормальной микрофлоре кожи, желудочно-кишечного и мочеполового трактов. При определённых условиях избыточный рост C. albicans может приводить к развитию орофарингеального кандидоза, вульвовагинального кандидоза и кандидемии.

Образование хламидоспор является наиболее дифференцирующим признаком C. albicans. Агар для хламидоспор разработан для дифференциации C. albicans от других видов по способности к образованию хламидоспор. Среда приготовлена в соответствии с формулой Никерсона и Манковского.

Функции компонентов среды:

• сульфат аммония служит источником ионов, имитирующих метаболические процессы;
• дигидрофосфат калия обеспечивает буферные свойства среды;
• биотин поставляет витамины, необходимые для метаболизма;
• очищенный полисахарид служит источником углерода;
• трипановый синий является витальным красителем, который избирательно поглощается хламидоспорами и окрашивает их в синий цвет, тогда как гифы остаются бесцветными.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,1 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика выявления хламидоспор

1. С помощью стерильной иглы нанесите инокулят на поверхность агара, процарапав разрезы в форме буквы X.
2. Асептически поместите на поверхность агара покровное стекло, предварительно обработанное пламенем спиртовки и охлаждённое. Покровное стекло должно располагаться над пересечением линий X-образного разреза.
3. Инкубируйте чашки при 20–25 °C в течение 2–6 суток. Температура не должна превышать 25 °C, поскольку более высокая температура не позволяет образовываться хламидоспорам.
4. Исследуйте чашки под малым увеличением микроскопа.

После инкубации большинство штаммов C. albicans и C. stellatoide образуют типичные хламидоспоры. Хламидоспоры обнаруживаются по краю покровного стекла; они имеют округлую форму, толстую стенку, синюю окраску и располагаются на концах гиф.

Некоторые штаммы C. albicans могут утрачивать способность образовывать хламидоспоры после многократных пересевов.

Типы образцов

• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до синего цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется непрозрачный гель синего цвета.

Реакция

Реакция 3,71%-ного водного раствора при 25 °C: pH 5,1 ± 0,2.

Диапазон pH

4,90–5,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 20–25 °C в течение 2–6 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Область применения

Среда используется для микробиологического исследования:

• пищевых продуктов;
• воды;
• культур дрожжеподобных грибов при дифференциации Candida albicans от других видов Candida.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Сухой продукт хранить в плотно закрытой ёмкости.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Ограничения применения

Для получения оптимальных результатов рекомендуется температура 25 °C.

Меры предосторожности

Перед открытием ёмкости ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M113-100G
• Назначение изделия: агар для выявления хламидоспор
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Рабочая температура инкубации: 20–25 °C
• Продолжительность инкубации: 2–6 суток
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 5,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 4,90–5,30
• Упаковка: HDPE — полиэтилен высокой плотности

По сравнению с универсальными питательными агарами, среда содержит трипановый синий для селективного окрашивания хламидоспор и предназначена для дифференциации Candida по морфологическому признаку их образования.