HiMedia M112S-500G Основа мочевинного агара (Кристенсен)

Порошкообразная основа мочевинного агара (Кристенсен) HiMedia M112S-500G массой 500 г предназначена для выявления продукции уреазы. Основа используется для дифференциации уреазоположительных микроорганизмов, включая Proteus vulgaris, при приготовлении среды с добавлением стерильного 40%-ного раствора мочевины.

Назначение

Основа мочевинного агара рекомендована для выявления продукции уреазы, особенно у Proteus vulgaris, микрококков и параколон-бактерий. Среда позволяет дифференцировать быстро уреазоположительные виды Proteus и другие уреазоположительные микроорганизмы, включая Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, а также бактерии, не относящиеся к семейству Enterobacteriaceae.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Принцип действия и интерпретация

Основа мочевинного агара представляет собой небольшую модификацию состава Кристенсена и рекомендована Бюро индийских стандартов (BIS) для идентификации уреазной активности. Исходная среда для выявления уреазной активности была разработана Растиганом и Стюартом.

Добавление пептического перевара животной ткани и декстрозы при сниженной концентрации буфера поддерживает ранний обильный рост микроорганизмов.

Большое количество инокулята наносят на поверхность скошенной среды. При утилизации мочевины в процессе инкубации образуется аммиак, который подщелачивает среду и вызывает изменение окраски индикатора фенолового красного на розово-красную. Продолжительная инкубация может привести к щелочной реакции среды, поэтому результат следует оценивать с учётом времени инкубации.

В качестве отрицательного контроля используют среду без мочевины.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,51 г основы в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильного 40%-ного раствора мочевины FD048 и тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Оставьте пробирки в наклонном положении до застывания среды.

Не перегревайте и не подвергайте среду повторному нагреванию, поскольку мочевина легко разлагается.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок светло-розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенной поверхности формируется прозрачный гель желтовато-оранжевого цвета.
• Реакция: реакция 2,45%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.
• Концентрация водного раствора для оценки реакции: 2,45 % м/о.
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Гелеобразующая способность: соответствует 1,5%-ному агар-агаровому гелю.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Хранение

Храните порошкообразную основу в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Методические ограничения

Не перегревайте и не разогревайте повторно приготовленную среду: мочевина легко разлагается. Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды, поэтому для интерпретации результатов необходимо соблюдать указанный режим инкубации 35–37 °C в течение 18–24 ч и использовать среду без мочевины в качестве отрицательного контроля.