Основа уреазного агара (по Кристенсену) HiMedia M112I-500G (500 г)

Основа питательной среды «Основа уреазного агара (по Кристенсену) HiMedia M112I-500G (500 г)» — порошкообразный препарат для выявления продукции уреазы. Применяется для анализа пищевых продуктов и воды, особенно для обнаружения уреазоположительных представителей рода Proteus; приготовленная среда используется в виде скошенного агара.

Назначение

Основа уреазного агара по Кристенсену предназначена для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus. Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 6579-1:2017.

Состав

Состав приведён в соответствии с ISO 6579-1:2017.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,01 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной добавки U40 — по 5 мл из каждого флакона — (FD048) и тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Дайте среде застыть в наклонном положении, чтобы сформировать скошенную поверхность.

Не перегревайте и не подвергайте среду повторному нагреву, поскольку мочевина легко разлагается.

Принцип измерения и интерпретация

Уреазный агар описан Кристенсеном для выявления уреазной активности у всех быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae, для которых характерна замедленная уреазная реакция.

Особенности состава, обеспечивающие выявление уреазной активности:

• добавление глюкозы в питательную среду;
• снижение концентрации пептона;
• уменьшение буферной ёмкости среды, благодаря чему фиксируется даже небольшое количество образовавшейся щёлочи.

Для выявления быстрой уреазной активности комитет ISO рекомендовал основу уреазного агара по Кристенсену M112I с одной фосфатной солью вместо двух фосфатных солей.

На поверхность скошенной среды вносят большое количество исследуемой культуры. Во время инкубации мочевина используется микроорганизмами с образованием аммиака. Аммиак повышает щёлочность среды, что вызывает изменение окраски индикатора фенолового красного от оранжевой до розовой или красно-розовой. Длительная инкубация может привести к появлению щелочной реакции среды независимо от специфичности результата. В качестве отрицательного контроля используют среду без мочевины.

Функции компонентов:

• пептон является источником азота и углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• декстроза служит источником энергии;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• фосфаты выполняют буферную функцию;
• мочевина гидролизуется с высвобождением аммиака;
• феноловый красный выявляет образовавшуюся щёлочь по видимому изменению окраски от оранжевой до розовой.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Образцы воды.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• Длительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды.
• Все среды для определения уреазы основаны на образовании щёлочи и поэтому не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности.
• Использование белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков.
• Избыточное высвобождение аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-оранжевого цвета.

Реакция: реакция 2,4%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления 40%-ной добавки U40 — 5 мл на флакон — (FD048) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Proteus hauseri ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Klebsiella aerogenes ранее обозначалась как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Наименование: основа уреазного агара по Кристенсену.
• Модель: M112I-500G.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Масса: 500 г.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.
• Условия контроля реакции: 2,4%-ный водный раствор при 25 °C.
• Условия оценки культуральных характеристик: добавка U40 (5 мл на флакон) (FD048), инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Упаковка: плотно закрытый контейнер.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории