HiMedia M112I-100G Основа мочевинного агара, Кристенсен

Основа мочевинного агара HiMedia M112I-100G (Кристенсен) предназначена для выявления уреазоактивных микроорганизмов, в частности представителей рода Proteus. Состав и критерии эффективности среды соответствуют международному стандарту ISO 6579-1:2017.

Принцип измерения

Среда основана на методике Кристенсена для определения активности фермента уреазы. В состав включена глюкоза, снижена концентрация пептона и ослаблена буферная система, что позволяет обнаруживать даже минимальное количество щелочи, образующейся при гидролизе мочевины.

При посеве на поверхность скоса в процессе инкубации мочевина расщепляется с образованием аммиака, который защелачивает среду. Это приводит к изменению цвета индикатора фенолового красного с оранжевого на розово-красный.

Функции компонентов:

• Пептон: источник азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Декстроза: энергетический ресурс.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• Фосфаты: буферизация среды.
• Мочевина: субстрат для гидролиза с высвобождением аммиака.
• Феноловый красный: индикатор защелачивания.

Область применения

Среда используется для анализа проб пищевых продуктов, молочных продуктов и воды. Применяется в микробиологических лабораториях для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и рода Proteus.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 24,01 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной добавки U40 (по 5 мл из каждого флакона, арт. FD048) и тщательно перемешайте.
6. Разлейте по стерильным пробиркам и залейте скосом.

Важно: Не допускайте перегрева или повторного нагрева среды, так как мочевина легко разлагается.

Технические характеристики

Физико-химические свойства

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Желирование: плотное, сопоставимо с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтовато-оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках-скосах).
• Значение pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,60–7,00).

Спецификации

Состав

Состав соответствует стандарту ISO 6579-1:2017.

Культуральные характеристики

Результаты после добавления 40 % добавки U40 (FD048) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM. Proteus hauseri ранее именовался Proteus vulgaris. Klebsiella aerogenes ранее именовался Enterobacter aerogenes.

Ограничения и предостережения

• Длительная инкубация может привести к ложноположительной щелочной реакции.
• Среда не является специфичной для определения абсолютной скорости активности уреазы.
• Гидролиз белков может повысить pH до щелочного значения из-за высвобождения избытка аминокислот, что вызывает ложноположительный результат.
• Рекомендуется использовать отрицательный контроль (среду без мочевины).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.