М-агар для обнаружения Klebsiella spp. HiMedia M1124-500G (уп/500 гр)

Питательная агаровая среда HiMedia M-агар для обнаружения Klebsiella spp. HiMedia M1124-500G (уп/500 гр) для мембранной фильтрации, содержащая инозит и карбенициллин для селективного выделения клебсиелл. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения Klebsiella в пробах воды; объём образца подбирают для получения 20–60 колоний на мембранном фильтре, а предполагаемые колонии подтверждают биохимическими тестами.

Назначение

Среда предназначена для обнаружения и количественного определения Klebsiella в пробах воды методом мембранной фильтрации.

Модифицированная среда M-FC Agar Base применяется для подсчёта клебсиелл. Klebsiella широко распространены в природе и встречаются в почве, воде, зерне и растительности. Большое количество Klebsiella может содержаться в сточных водах предприятий целлюлозно-бумажной, текстильной и сахарной промышленности; в таких стоках клебсиеллы часто являются преобладающими колиформными микроорганизмами.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 49,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Добавьте 10 мл 1%-ного раствора розоловой кислоты FD058.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Добавьте 50 мг карбенициллина.
7. Тщательно перемешайте.
8. Асептично разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип измерения и интерпретация результатов

M-FC Agar Base, Modified используют для количественного определения Klebsiella методом мембранной фильтрации. Модификация M-FC-агара заключается в замене лактозы на инозит и добавлении карбенициллина.

Протеозопептон, триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы питательными веществами, необходимыми для роста фекальных колиформ. Инозит является ферментируемым углеводом и источником углерода. Смесь желчных солей подавляет рост контаминирующих грамположительных микроорганизмов. Анилиновый синий представляет собой трифенилметановый краситель, подавляющий рост многих грамположительных микроорганизмов; совместно с розоловой кислотой он образует индикаторную систему среды. Карбенициллин подавляет сопутствующие колиформы и другие бактерии, способствуя селективному выделению видов Klebsiella.

Объём исследуемого образца подбирают так, чтобы на одной мембране формировалось от 20 до 60 колоний Klebsiella. Мембранный фильтр асептично укладывают на поверхность агара.

Колонии Klebsiella приобретают тёмно-синюю или сине-серую окраску под действием анилинового синего. Предположительные колонии необходимо дополнительно подтвердить биохимическими тестами. Иногда ложноположительные результаты могут быть обусловлены присутствием видов Enterobacter.

Тип образца

Тип образца: пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Иногда ложноположительные результаты могут быть обусловлены видами Enterobacter.
• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различные характеристики роста на этой среде.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

После добавления 1%-ной розоловой кислоты FD058 в чашках Петри образуется гель красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция и pH

Реакция: реакция 4,96%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 1%-ной розоловой кислоты FD058 и 50 мг/л карбенициллина, после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения: * соответствующие номера WDCM; # ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Условия хранения после вскрытия: хранить в сухом виде в плотно закрытом флаконе для предотвращения комкования вследствие гигроскопичности порошка.
• Условия помещения: сухое, вентилируемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Готовая среда: хранить при 2–8 °C.
• После использования: плотно закрывать контейнер.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• В оригинальном описании каталога указано, что хранить готовую среду не рекомендуется; данные производителя предусматривают хранение приготовленной среды при 2–8 °C.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель: M1124-500G
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Назначение изделия: агар
• Масса упаковки: 500 г
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Температура инкубации для оценки культуральных характеристик: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации для оценки культуральных характеристик: 18–24 ч
• Концентрация раствора для контроля реакции: 4,96 % вес/об.
• Концентрация розоловой кислоты: 1 %
• Количество розоловой кислоты на 1000 мл среды: 10 мл
• Количество карбенициллина: 50 мг
• Целевое количество колоний на мембранном фильтре: 20–60

Сравнительное техническое отличие

В модифицированной M-FC-среде лактоза заменена на инозит, а карбенициллин добавлен для подавления сопутствующих колиформ и других бактерий; наличие анилинового синего и розоловой кислоты обеспечивает индикаторную систему среды.

Совместимость

• Розоловая кислота FD058, стерильный 1%-ный раствор.
• Карбенициллин.
• Мембранные фильтры.
• Стерильные чашки Петри.

Дополнительные сведения

Среда сформулирована по рекомендациям APHA для количественного определения Klebsiella в воде.