М-агар для обнаружения Klebsiella spp. HiMedia M1124-500G (уп/500 гр)

Модифицированный М-агар для обнаружения Klebsiella spp. HiMedia M1124-500G предназначен для выделения и подсчета клебсиелл в пробах воды методом мембранной фильтрации. Среда обеспечивает селективный рост бактерий за счет замены лактозы инозитом и добавления карбенициллина.

Принцип измерения

Среда разработана в соответствии с рекомендациями APHA (Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater) для количественного определения Klebsiella. В данной модификации лактоза заменена инозитом, который служит ферментируемым углеводом и источником углерода.

Селективность и индикация обеспечиваются следующими компонентами:

• Карбенициллин: подавляет рост сопутствующих колиформ и других бактерий, способствуя селективной изоляции видов Klebsiella.
• Смесь желчных кислот и анилиновый синий: ингибируют рост большинства грамположительных микроорганизмов.
• Анилиновый синий и розоловая кислота: образуют индикаторную систему. В результате взаимодействия с анилиновым синим колонии клебсиелл приобретают темно-синий или сине-серый цвет.

Триптоза, протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают комплекс питательных веществ (азот, сера, витамины, минералы), необходимых для роста фекальных колиформ.

Методика проведения анализа

1. Подготовка пробы: Объем исследуемой воды подбирают таким образом, чтобы на мембранном фильтре выросло от 20 до 60 колоний Klebsiella.
2. Посев: Мембранный фильтр с задержанной пробой асептично укладывают на поверхность агара.
3. Инкубация: Чашки Петри инкубируют при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.
4. Оценка результатов:
   • Колонии Klebsiella выглядят темно-синими или сине-серыми.
   • Предположительные колонии должны быть подтверждены с помощью биохимических тестов.

Приготовление среды

1. Растворить 49,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. ВНИМАНИЕ: Среду нельзя автоклавировать.
4. Добавить 10 мл стерильного 1%-ного раствора розоловой кислоты (FD058).
5. Остудить до температуры 45–50 °C и асептично добавить 50 мг карбенициллина.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Основные параметры

• Назначение: селективный подсчет Klebsiella spp.
• Тип среды: сухая (обезвоженная)
• Форма выпуска: гомогенный сыпучий порошок от светло-желтого до серовато-желтого цвета
• Цвет готового геля: красный (после добавления розоловой кислоты), от прозрачного до слегка опалесцирующего
• Плотность геля: соответствует 1,5%-ному агаровому гелю
• Значение pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2 (диапазон 7,20–7,60)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав (г/л)

Дополнительные спецификации

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании 1% розоловой кислоты (FD058) и 50 мг/л карбенициллина после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ограничения и предостережения

• Возможны ложноположительные результаты, вызванные ростом видов Enterobacter.
• Индивидуальные микроорганизмы могут проявлять вариативность в требованиях к росту и характере колоний на данной среде.
• При работе с культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Порошок: хранить в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C в сухом проветриваемом месте, защищенном от источников воспламенения. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте бутылку во избежание образования комков.
• Готовая среда: хранить при температуре от +2, до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с пробами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.