М-агар РА для технологии мембранных фильтров HiMedia M1121A-500G (уп/500 гр)

Селективная сухая питательная среда М-агар РА для технологии мембранных фильтров HiMedia M1121A-500G (уп/500 г). Применяется для селективного обнаружения и изоляции Pseudomonas aeruginosa из проб воды.

Принцип измерения

Среда разработана как селективный инструмент для выделения Pseudomonas aeruginosa методом мембранной фильтрации. В состав включены антибиотики канамицин и налидиксовая кислота, которые обеспечивают умеренную селективность, подавляя рост чувствительных грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Экстракт дрожжей, лизин и углеводы: источники азота, энергии и витаминов для метаболизма бактерий.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• Неорганические соли: обеспечение необходимыми ионами.
• Канамицин: ингибирует синтез белка у грамположительных организмов.
• Налидиксовая кислота: блокирует репликацию чувствительных грамотрицательных бактерий.
• Феноловый красный: индикатор pH, который при ферментации углеводов в кислых условиях меняет цвет среды на жёлтый.

Данная модификация среды (без сульфапиридина и циклогексимида) позволяет проводить подсчёт Pseudomonas aeruginosa в течение 24 часов инкубации при 41,5 °C, что значительно быстрее традиционного метода наиболее вероятного числа (MPN).

Методика проведения анализа

1. Профильтруйте пробу воды через стерильный сетчатый фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
2. Поместите мембранный фильтр на поверхность чашки с М-агаром РА, следя за тем, чтобы между фильтром и агаром не оставалось пузырьков воздуха.
3. Инкубируйте в аэробной атмосфере в течение 24 часов при температуре 41,5 ± 0,5 °C.
4. Оцените плотность колоний:
   • Оптимальная плотность: 20–200 колоний на фильтре.
   • При плотности $\le$ 2 колоний на квадрат: подсчитываются все колонии.
   • При плотности 3–10 колоний на квадрат: определяется среднее значение по 10 квадратам.
   • При плотности 10–20 колоний на квадрат: определяется среднее значение по 5 квадратам.
5. Рассчитайте итоговое количество колоний на мл, умножив среднее число колоний на квадрат на 100 и на обратную величину разведения.

Приготовление среды

1. Растворите 35,18 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте при перемешивании и кипятите в течение 1 минуты до полного растворения компонентов.
3. ВНИМАНИЕ: Не автоклавировать.
4. Охладите до 45–50 °C и разлейте по стерильным чашкам Петри.
5. Используйте среду в течение 1 недели после приготовления.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,1

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: оранжево-красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 7,10–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 41,5 ± 0,5 °C в течение до 72 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка и готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Соответствие: методика включена в раздел 914 C «Метод мембранной фильтрации для P. aeruginosa» (предварительный) 16-й / 19-й редакций Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater.