М-агар РА для технологии мембранных фильтров HiMedia M1121A-500G (уп/500 гр)

Питательная агаризованная среда М-агар РА для технологии мембранных фильтров HiMedia M1121A-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного выявления и выделения Pseudomonas aeruginosa методом мембранной фильтрации. Среда применяется для микробиологического анализа проб воды, включая количественный подсчёт колоний после инкубации при 41,5 ± 0,5 °C, и не подлежит автоклавированию.

Назначение

М-агар РА используют для селективного выявления, выделения и количественного определения Pseudomonas aeruginosa в пробах воды методом мембранной фильтрации.

Метод наиболее применим для анализа больших объёмов воды. Метод наиболее вероятного числа (MPN) обеспечивает удовлетворительное восстановление Pseudomonas aeruginosa, однако не подходит для исследования больших объёмов воды и характеризуется недостаточной точностью восстановления Pseudomonas aeruginosa.

Среда M-PA Agar разработана Levin и Cabelli как селективная мембранно-фильтрационная среда для Pseudomonas aeruginosa. Модифицированный М-агар РА позволяет провести подсчёт Pseudomonas aeruginosa в течение 24 ч инкубации при 41,5 °C вместо 72 ч, требуемых для предварительного теста M-PN.

М-агар РА включён в раздел 914 C «Мембранно-фильтрационный метод для Pseudomonas aeruginosa» (предварительная методика) 16-го/19-го издания Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Дрожжевой экстракт, лизин и углеводы обеспечивают азотсодержащие соединения, источники энергии и витамины, необходимые для бактериального метаболизма. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Неорганические соли обеспечивают микроорганизмы необходимыми ионами.

Канамицин ингибирует синтез белка у грамположительных организмов. Циклогексимид (FD202) подавляет грибковую микрофлору. Налидиксовая кислота блокирует репликацию чувствительных грамотрицательных бактерий. Феноловый красный служит индикатором pH и приобретает жёлтую окраску в кислых условиях вследствие ферментации углеводов.

Первоначальная формула М-агара РА включала четыре антимикробных компонента: канамицин, налидиксовую кислоту, сульфапиридин и циклогексимид, обеспечивавшие умеренную селективность среды. Исходная среда была модифицирована повышением pH и изменением состава или концентрации компонентов. В дальнейшей модификации сульфапиридин и циклогексимид были исключены.

Подготовка среды

1. Суспендируйте 35,18 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при перемешивании и кипятите в течение 1 мин до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите раствор до 45–50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
6. Используйте приготовленную среду в течение 1 недели после приготовления.

Методика проведения анализа методом мембранной фильтрации

1. Пропустите пробу воды через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм и координатной сеткой.
2. Поместите мембранный фильтр на поверхность среды в чашке М-агара РА. Не допускайте образования пузырьков воздуха между агаром и поверхностью фильтра.
3. Инкубируйте чашки в аэробной атмосфере в течение 24 ч при температуре 41,5 ± 0,5 °C.
4. Оптимальная плотность роста на мембранном фильтре составляет 20–200 колоний.
5. При плотности не более 2 колоний на квадрат сетки подсчитайте все колонии на фильтре.
6. При наличии 3–10 колоний на квадрат определите среднее количество колоний по 10 квадратам.
7. При наличии 10–20 колоний на квадрат определите среднее количество колоний по 5 квадратам.
8. Для расчёта количества колоний на 1 мл умножьте среднее количество колоний на квадрат на 100 и на обратную величину коэффициента разведения.

Технические характеристики

• Наименование: М-агар РА для технологии мембранных фильтров
• Артикул: M1121A-500G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,1
• Диапазон pH: 7,10–7,30
• Температура охлаждения перед разливом в чашки Петри: 45–50 °C
• Температура инкубации: 41,5 ± 0,5 °C
• Время инкубации для анализа: 24 ч
• Продолжительность наблюдения культуральных характеристик: до 72 ч
• Температура хранения сухого порошка и приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид сухого продукта: однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета
• Реакция: реак