Основа уреазного агара (по Кристенсену) HiMedia M112-500G (уп/500 гр)

Питательная среда «Основа уреазного агара (по Кристенсену) HiMedia M112-500G (уп/500 гр)» — автоклавируемая основа для приготовления уреазного агара с добавлением мочевины. Среда применяется для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus, но не предназначена для определения абсолютной скорости уреазной активности.

Назначение

Основа уреазного агара по Кристенсену с добавлением мочевины предназначена для определения продукции уреазы, в частности у представителей рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae с замедленной уреазной реакцией.

Тип питательной среды: специальная
Назначение изделия: основа
Производитель: HiMedia
Артикул: M112
Форма выпуска: 500 г
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Соответствие: ГОСТ Р 52814-2007

Среда применяется для исследования изолированных микроорганизмов из клинических образцов, пищевых продуктов и воды.

Идентификация продукта

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,01 г основы в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов (≈0,069 МПа) и температуре 115 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной добавки U40 — по 5 мл из каждого флакона — и тщательно перемешайте. Используется добавка U40 Supplement, поставляемая под артикулом FD048.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Оставьте пробирки для застывания в наклонном положении.

Не допускается перегревать или повторно нагревать приготовленную среду, поскольку мочевина легко разлагается.

Принцип действия и интерпретация

Уреазный агар используется для выявления продукции уреазы. В среде по Кристенсену уреазная активность быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus выявляется, а также определяется замедленная уреазная реакция у других представителей Enterobacteriaceae.

Повышенная чувствительность среды к замедленной уреазной реакции обеспечивается следующими изменениями состава:

1. Добавлением глюкозы в среду.
2. Снижением концентрации пептона.
3. Уменьшением буферной ёмкости среды, благодаря чему выявляется даже небольшое количество щёлочи.

Функции компонентов:

• Пептон: источник необходимых питательных веществ.
• Декстроза: источник энергии.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия среды.
• Фосфаты: буферная система среды.
• Мочевина: гидролизуется с выделением аммиака.
• Феноловый красный: индикатор щёлочности, возникающей при реакции; изменение pH сопровождается видимым изменением окраски от оранжевой до розовой.

Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды. Для исключения ложноположительных результатов используют среду без мочевины в качестве отрицательного контроля.

Все среды для уреазного теста основаны на выявлении образования щёлочи и поэтому не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности. Использование белков может повысить pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков; избыточное высвобождение аминокислот способно привести к ложноположительной реакции.

Ограничения метода

1. Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды.
2. Среды для уреазного теста основаны на образовании щёлочи и не предназначены для определения абсолютной скорости уреазной активности.
3. Использование белков может повысить pH до щелочных значений из-за гидролиза белков, а избыточное высвобождение аминокислот может привести к ложноположительной реакции.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Желирование

Прочный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 2,4 % при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления стерильной добавки U40 — 5 мл из каждого флакона — FD048 и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• *: соответствующие номера WDCM.
• #: ранее название Enterobacter aerogenes.
• $: ранее название Proteus vulgaris.

Образцы

Тип образца: изолированный микроорганизм из клинических образцов, пищевых продуктов и воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для пищевых продуктов и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и местным стандартам.
• Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой основы: от 10 до 30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки и дополнительные компоненты

По заявке поставляется раствор мочевины:

• FD048 — мочевина, 40%-ный раствор; 10 флакончиков по 5 мл.

Для приготовления среды требуется 50 мл стерильной добавки U40 — по 5 мл из каждого флакона FD048.