Основа питательной среды HiMedia M112-100G «Основа мочевинного агара (Кристенсен)» предназначена для приготовления автоклавируемой мочевинной среды с добавлением мочевины. Основа применяется для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus, при исследовании клинических, пищевых и водных образцов.

Идентификация продукта

Назначение

Основа мочевинного агара с добавлением мочевины применяется для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus.

Состав

Для приготовления среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 24,01 г основы в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов (ориентировочно 0,069 МПа) и температуре 115 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной добавки U40 Supplement — по 5 мл на флакон, FD048 — и тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Оставьте пробирки в наклонном положении до застывания среды.

Не допускайте перегрева и повторного нагревания среды, поскольку мочевина легко разлагается.

Принцип действия и интерпретация

Мочевинный агар применяется для выявления продукции уреазы. Мочевинный агар по Кристенсену позволяет выявлять уреазную активность у всех быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae, у которых уреазная реакция развивается с задержкой.

Для повышения выявляемости задержанной уреазной реакции в состав среды внесены следующие изменения:

• добавлена глюкоза;
• снижена концентрация пептона;
• снижена буферная ёмкость среды, благодаря чему среда выявляет даже небольшое количество образовавшейся щёлочи.

Функции компонентов:

• пептон служит источником необходимых питательных веществ;
• декстроза является источником энергии;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• фосфаты выполняют буферную функцию;
• мочевина гидролизуется с высвобождением аммиака;
• индикатор феноловый красный выявляет образующуюся щёлочь по видимому изменению окраски от оранжевой до розовой.

Продолжительная инкубация может привести к щелочной реакции среды. Для исключения ложноположительных результатов используют среду без мочевины в качестве отрицательного контроля. Все среды для уреазного теста основаны на выявлении образования щёлочи и поэтому не предназначены для определения абсолютной скорости уреазной активности. Утилизация белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков, а избыточное высвобождение аминокислот способно вызывать ложноположительную реакцию.

Ограничения метода

1. Продолжительная инкубация может привести к появлению щелочной реакции в среде.
2. Все среды для уреазного теста основаны на выявлении образования щёлочи и не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности.
3. Утилизация белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков; избыточное высвобождение аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,4 % мас./об. при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления стерильной добавки U40 Supplement — 5 мл на флакон, FD048 — и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее назывался Enterobacter aerogenes.

$ Ранее назывался Proteus vulgaris.

Тип образца

Изолированный микроорганизм из клинических, пищевых и водных образцов.

Отбор и обращение с образцами

• Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• Для водных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативам.
• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно утверждённым руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой основы: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде; для предотвращения образования комков плотно закрывайте флакон.
• Продукт обладает гигроскопичностью, поэтому при ненадлежащем хранении возможно образование комков.
• Храните в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.