HiMedia M112-100G Основа мочевинного агара (Кристенсен)

Основа мочевинного агара (Кристенсен) HiMedia M112-100G для определения уреазы в микробиологических исследованиях. Применяется для выявления уреазоположительных микроорганизмов, в частности представителей рода Proteus; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Среда используется для обнаружения продукции уреазы. В модификации по Кристенсену чувствительность к уреазной активности повышена за счет:

• добавления глюкозы;
• снижения концентрации пептона;
• уменьшения мощности буферной системы, что позволяет регистрировать даже незначительное количество щелочи.

Пептон служит источником основных питательных веществ, декстроза — источником энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты выполняют роль буфера. Мочевина гидролизуется с высвобождением аммиака. Индикатор феноловый красный регистрирует повышение щелочности, что проявляется изменением цвета среды с оранжевого на розовый.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 24,01 г основы в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 115 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 20 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 50 мл стерильной добавки U40 (по 5 мл на флакон) (FD048), тщательно перемешайте.
5. Разлейте в стерильные пробирки и оставьте до застывания в наклонном положении (скос).

Важно: не перегревайте и не повторно нагревайте среду, так как мочевина легко разлагается.

Область применения

Среда предназначена для анализа изолированных микроорганизмов из следующих источников:

• клинические образцы;
• пробы пищевых продуктов и молочных изделий;
• пробы воды.

Технические характеристики

• Финальный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: светло-желтый или светло-розовый гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: желто-оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках-скосах)
• pH водного раствора (2,4 % в/в при 25 °C): 6,60–7,00

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Интерпретация результатов и ограничения

Длительная инкубация может привести к спонтанной щелочной реакции среды. Для исключения ложноположительных результатов необходимо использовать отрицательный контроль (среду без мочевины).

Поскольку все тесты на мочевину основаны на образовании щелочи, они не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности. Гидролиз белков может привести к повышению pH до щелочного значения из-за высвобождения избытка аминокислот, что вызывает ложноположительную реакцию.

Культуральные характеристики

Результаты получены при добавлении стерильной добавки U40 (FD048) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование: только для профессионального применения in vitro.
• Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с клиническими образцами.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.