Основа энтерококкового М-бульона Сланетца для технологии мембранных фильтров HiMedia M1113-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа энтерококкового М-бульона Сланетца для технологии мембранных фильтров HiMedia M1113-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — порошковая среда для мембранной фильтрации, фасовка 500 г. Применяется для обнаружения и выделения энтерококков в пробах воды; после приготовления требует асептического добавления 1%-ного раствора трифенилтетразолия хлорида TTC FD057.

Назначение

Основа энтерококкового М-бульона Сланетца предназначена для выделения и обнаружения энтерококков методом мембранной фильтрации.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип образца: пробы воды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2

Принцип метода и интерпретация результатов

Метод мембранной фильтрации применяют для анализа относительно больших объёмов проб. Стерильные мембранные фильтры асептически размещают на стерильных абсорбирующих ватных подложках, насыщенных соответствующей питательной средой.

Энтерококки как представители фекальной группы стрептококков служат бактериальным индикатором степени фекального загрязнения рекреационных поверхностных вод. Основа энтерококкового М-бульона Сланетца разработана по формуле Сланетца и Бартли для выделения и обнаружения энтерококков методом мембранной фильтрации. Среда представляет собой модификацию М-агара для энтерококков, разработанного Сланетцем, Бентом и Бартли.

Функции компонентов среды:

• триптон, пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду необходимыми азотсодержащими соединениями и витаминами группы B;
• декстроза и сахароза являются ферментируемыми источниками углеводов;
• двузамещённый фосфат калия выполняет буферную функцию;
• азид натрия подавляет рост большинства сопутствующих грамотрицательных микроорганизмов;
• трифенилтетразолия хлорид восстанавливается энтерококками до формазана — окрашенного в красный цвет комплекса внутри бактериальной клетки, вследствие чего на поверхности мембранного фильтра образуются красные колонии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 156,4 г порошковой основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — около 0,10 МПа (15 psi).
4. Охладите среду.
5. В асептических условиях добавьте один флакон TTC — 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида — FD057 на каждый литр среды.
6. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Проведение анализа

1. Насыщают стерильные абсорбирующие ватные подложки приготовленной основой энтерококкового М-бульона Сланетца.
2. Пропускают пробу воды через мембранный фильтр.
3. Асептически помещают мембранный фильтр на насыщенную стерильную абсорбирующую ватную подложку.
4. Инкубируют при 35–37 °C в течение 40–48 ч.
5. Интерпретируют результат по образованию красных колоний энтерококков на поверхности мембранного фильтра.
6. После использования загрязнённые материалы стерилизуют автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор жёлтого цвета; возможно наличие небольшого осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 15,6 % при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют на мембранном фильтре после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C
• Условия хранения сухой основы: плотно закрытая ёмкость
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования ёмкость следует плотно закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

• Для идентификации видов требуются дополнительные биохимические исследования.
• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различные характеристики роста на этой среде.
• Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных задач.
• Рабочие характеристики среды гарантируются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Реагенты и расходные материалы

Для приготовления рабочей среды требуется 1%-ный раствор трифенилтетразолия хлорида TTC:

• FD057 — раствор трифенилтетразолия хлорида концентрацией 1 %, упаковка из 5 флаконов по 10 мл.

Комплект поставки

• Основа энтерококкового М-бульона Сланетца для технологии мембранных фильтров HiMedia M1113-500G — упаковка 500 г.