Агар для энтерококков для мембранной технологии HiMedia M1108-500G (уп/500 гр)

Питательная селективная среда HiMedia M1108-500G M-Enterococcus Agar Base (уп/500 гр) для выделения и количественного определения энтерококков мембранным методом; форма выпуска — порошок в упаковке из ПЭВП. Среда применяется для анализа воды, сточных вод, пищевых продуктов и других материалов, а также допускает прямой посев образцов.

Назначение

Агар HiMedia M1108-500G M-Enterococcus Agar Base предназначен для выделения и подсчёта энтерококков методом мембранной фильтрации, а также для прямого посева образцов. Тип питательной среды: диагностический. Назначение изделия: агар.

Типы образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Количество компонентов указано в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда разработана Slanetz, Bent и Bartley для количественного определения энтерококков методом мембранной фильтрации. Позднее Slanetz и Bartley модифицировали среду добавлением хлорида трифенилтетразолия (TTC) и установили, что при размещении мембранных фильтров непосредственно на поверхности агара образуются более крупные колонии и получают более высокие результаты подсчёта по сравнению с использованием прокладок, насыщенных жидкой средой.

Среда обладает высокой селективностью. Добавление полисорбата 80 в количестве 0,5 мл/л и карбоната натрия — 2 мл 10%-ного водного раствора на литр — применяется для повышения чувствительности при прямом посеве пищевых продуктов и увеличения размера колоний. Согласно стандартным методикам, M-Enterococcus Agar используется для обнаружения фекальных групп Streptococcus и Enterococcus методом мембранной фильтрации.

Функции компонентов:

• триптон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и декстроза служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ;
• азид натрия подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов;
• TTC служит быстрым индикатором роста бактерий;
• TTC восстанавливается внутри бактериальных клеток до нерастворимого формазана, окрашивающего колонии в красный цвет.

После инкубации в качестве энтерококков подсчитывают все колонии светло-красного и тёмно-красного цвета.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 41,5 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не перегревайте среду и не стерилизуйте её в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 0,5 мл полисорбата 80 и 2 мл 10%-ного водного раствора карбоната натрия.
6. Разлейте среду в чашки Петри.

Методика мембранной фильтрации

1. Подберите объём образца так, чтобы после фильтрации образовалось 20–60 колоний.
2. Перенесите мембранный фильтр на поверхность агаровой среды асептически.
3. Не допускайте образования пузырьков воздуха под мембраной.
4. Инкубируйте чашки при 35 °C в течение 48 ч.
5. Подсчитайте все светло-красные и тёмно-красные колонии как колонии энтерококков.

Методика прямого посева

Среду можно инокулировать непосредственно штриховым посевом образца с последующей инкубацией чашек при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Для стандартного режима инкубируйте чашки при 35 °C в течение 48 ч.

Сбор и обращение с образцами

1. Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
2. Для водных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Из-за различий в пищевых потребностях могут встречаться штаммы, растущие слабо.
2. При слишком высокой посевной нагрузке характерный блеск колоний может быть подавлен.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-розового цвета.
• Реакция: реакция 4,15%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Звёздочкой (*) обозначены соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель и артикул: M1108-500G
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH среды при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Состояние контейнера: плотно закрытый.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните среду в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. Инфекционные материалы и материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с биологически опасными отходами.

Техническое отличие методик применения

В отличие от использования только методом мембранной фильтрации, M-Enterococcus Agar Base допускает также прямой штриховой посев образцов; добавление полисорбата 80 и карбоната натрия предусмотрено для повышения чувствительности прямого посева пищевых продуктов и увеличения размера колоний.