М-тест агар для обнаружения E.coli для технологии мембранных фильтров HiMedia M1095-500G (уп/500 гр)

Питательная среда М-тест агар для обнаружения E.coli для технологии мембранных фильтров HiMedia M1095-500G (уп/500 гр) — агар для мембранной фильтрации, поставляемый в упаковке 500 г. Среда предназначена для обнаружения, дифференциации и количественного определения Escherichia coli и колиформных микроорганизмов в пробах воды; среду нельзя автоклавировать или перегревать.

Назначение

Среда рекомендована для анализа проб воды на наличие Escherichia coli с использованием метода мембранной фильтрации. Также применяется для исследования пищевых продуктов, ингредиентов и сырья на наличие индикаторных групп микроорганизмов, включая колиформные бактерии.

Обнаружение колиформных микроорганизмов в питьевой воде указывает на недостаточную эффективность обработки, направленной на обеспечение безопасности воды. Определение Escherichia coli служит показателем степени фекального загрязнения поверхностных рекреационных вод и питьевой воды.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03709
• Тип исследуемого образца: пробы воды
• Метод анализа: мембранная фильтрация

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Пептон протеозный и дрожжевой экстракт обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста колиформных микроорганизмов. Лактоза служит источником углерода и сбраживаемым углеводом среды.

Дезоксихолат натрия и лаурилсульфат натрия подавляют рост контаминирующих грамположительных микроорганизмов. Пурпурный бромкрезол и красный бромфенол используются в качестве индикаторов pH.

При культивировании Escherichia coli образуются жёлтые или жёлто-коричневые колонии, что позволяет обнаруживать и учитывать микроорганизм после обработки мембранного фильтра мочевинным субстратом.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 45,26 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Физико-химические характеристики

• Конечное значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Реакция: для водного раствора концентрацией 4,5 % мас./об. при 25 °C
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
• Внешний вид сухой среды: от светло-жёлтого до зелёного однородный сыпучий порошок

Методика проведения анализа

1. Пропустите исследуемую пробу через мембранный фильтр.
2. Поместите мембранный фильтр на поверхность агара M-EC Test Agar.
3. Инкубируйте фильтр при температуре 35 ± 0,5 °C в течение 2 ч для восстановления повреждённых или стрессированных бактерий.
4. Продолжите инкубацию при температуре 44,5 ± 0,2 °C в течение 22 ч.
5. Перенесите фильтр на фильтровальную подложку, насыщенную мочевинным субстратом следующего состава: мочевина — 2,0 г, феноловый красный — 10 мг, дистиллированная вода — 100 мл.
6. Отрегулируйте pH мочевинного субстрата в диапазоне 3–4 и используйте приготовленный субстрат в течение одной недели.
7. Через 15 мин подсчитайте жёлтые или жёлто-коричневые колонии с использованием люминесцентной лампы и увеличительной линзы.
8. Жёлтые или жёлто-коричневые колонии интерпретируйте как колонии E. coli.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды:

• Внешний вид: от светло-жёлтого до зелёного однородный сыпучий порошок
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
• Реакция: водный раствор концентрацией 4,5 % мас./об. при 25 °C
• Значение pH: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Каждая партия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. Для применения с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах установленного срока годности.

Ограничения применения

• Из-за различий в питательных потребностях могут встречаться штаммы, растущие слабо.
• Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность и характер роста на среде.
• Для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, требуется отдельная проверка пригодности среды под конкретную задачу пользователя.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер.