Основа бульона для идентификации листерий HiMedia M1090-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды HiMedia «Основа бульона для идентификации листерий HiMedia M1090-500G (уп/500 гр)» предназначена для селективного обогащения и идентификации видов Listeria и имеет конечный pH 7,4 ± 0,2. Среда применяется для клинических, пищевых и молочных образцов после добавления селективной добавки FD061; ограничение применения — отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций питательных потребностей.

Назначение

Бульонная основа для идентификации листерий PALCAM применяется вместе с селективной добавкой Listeria Selective Supplement (PALCAM) FD061 для селективного обогащения и идентификации видов Listeria из клинических и не клинических образцов.

Тип образцов:

• Клинические образцы: кровь.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Образцы воды.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Бульон PALCAM — бульон для селективного обогащения видов Listeria, также известный как Polymyxin-Acriflavin-Lithium chloride-Ceftazidime-Aesculin-Mannitol Broth. Среда приготовлена по методике van Netten и соавторов.

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродсодержащие соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие питательные вещества, необходимые для роста.
• Высокое содержание хлорида лития и селективная добавка FD061, содержащая полимиксин B, гидрохлорид акрифлавина и цефтазидим, подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост видов Listeria.
• Соевый лецитин обладает свойствами, сходными со свойствами яичного желтка, поэтому дополнительное добавление эмульсии яичного желтка не требуется.
• После инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч приблизительно 0,1 мл бульона высевают штриховым методом на селективные агары для листерий: агар для идентификации листерий PALCAM M1064 или агар Oxford для листерий M1145.
• Сочетание маннита и фенолового красного используется для выявления ферментации маннита.
• Эскулин и цитрат аммония и железа совместно используются для выявления гидролиза эскулина.
• L. monocytogenes гидролизует эскулин, что приводит к образованию чёрного окрашивания среды.
• L. monocytogenes не ферментирует маннит, поэтому может быть дифференцирована от таких контаминирующих микроорганизмов, как Enterococci и Staphylococci: последние ферментируют маннит и вызывают изменение цвета среды с красного на жёлтый.
• Инкубация в микроаэрофильных условиях подавляет строгие аэробы, включая виды Bacillus и Pseudomonas.
• Методика выделения L. monocytogenes зависит от исследуемого материала. Обычно исследуемый образец сначала вносят в обогатительный бульон, чтобы обеспечить размножение микроорганизмов перед выделением и идентификацией.
• В зависимости от типа образца следует выбирать соответствующую методику и селективный обогатительный бульон.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,69 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Ориентировочное давление: ≈0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки для листерий PALCAM FD061.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки для листерий PALCAM FD061 и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор красного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 4,74 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: селективная.
• Назначение изделия: основа.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Материал упаковки: ПНД (HDPE).
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Рабочий диапазон pH: 7,20–7,60.
• Масса упаковки: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения основы: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Основа должна храниться в плотно закрытой ёмкости.
• После вскрытия флакон следует плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования к образцам и обращению

• Для клинических образцов следует применять соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых образцов следует применять соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды следует применять соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
• Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Ограничения применения

Из-за вариаций питательных потребностей отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Меры безопасности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• Работа со средой разрешена только обученному персоналу.
• При работе необходимо использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности.
• Следует обращаться к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Комплектующие и дополнительные компоненты

По заявке поставляется:

• FD061 Listeria Selective Supplement (PALCAM) — селективная добавка для листерий PALCAM.

Для получения рабочих характеристик среды селективная добавка FD061 должна быть восстановлена и асептически внесена в охлаждённую до 45–50 °C стерилизованную основу.

Отличие методики PALCAM

В отличие от неселективного обогащения, среда PALCAM сочетает селективное подавление сопутствующей микрофлоры хлоридом лития и добавкой FD061 с дифференциальным выявлением гидролиза эскулина и ферментации маннита по изменению окраски среды.