HiMedia M1090-100G Основа бульона для идентификации листерий

Питательная среда HiMedia M1090-100G Основа бульона для идентификации листерий представляет собой порошковую основу селективного бульона PALCAM для обогащения и идентификации видов Listeria. Применяется для клинических, пищевых и молочных образцов с последующим высевом на селективные агары; хранение основы — при 10–30 °C, подготовленной среды — при 2–8 °C.

Назначение

Основа бульона для идентификации листерий (PALCAM) с добавленным селективным супплементом предназначена для селективного обогащения и идентификации видов Listeria в клинических и неклинических образцах.

Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы, включая кровь;
• пищевые образцы;
• молочные образцы;
• водные образцы.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,69 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильно восстановленное содержимое одного флакона селективного супплемента для листерий PALCAM (FD061).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Бульон для идентификации листерий, также известный как бульон PALCAM — полимиксин-акрифлавин-хлорид лития-цефтазидим-эскулин-маннитол, — предназначен для селективного обогащения видов Listeria. Среда приготовлена по методике van Netten et al.

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие питательные вещества, необходимые для роста.
• Повышенное содержание хлорида лития и селективный супплемент FD061, содержащий полимиксин B, гидрохлорид акрифлавина и цефтазидим, подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост видов Listeria.
• Соевый лецитин обладает свойствами, сходными со свойствами яичного желтка, поэтому дополнительное внесение эмульсии яичного желтка не требуется.
• Сочетание маннитола и фенолового красного обеспечивает выявление ферментации маннитола.
• Эскулин в сочетании с цитратом аммония и железа обеспечивает выявление гидролиза эскулина.

После инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч приблизительно 0,1 мл бульона высевают штриховым методом на селективные агары для листерий, например на агар для идентификации листерий PALCAM (M1064) или агар Oxford для листерий (M1145).

L. monocytogenes гидролизует эскулин, что приводит к образованию чёрного окрашивания среды. L. monocytogenes не ферментирует маннитол, поэтому может быть дифференцирована от таких загрязняющих микроорганизмов, как Enterococci и Staphylococci: последние ферментируют маннитол и вызывают изменение окраски среды с красной на жёлтую.

Инкубация в микроаэрофильных условиях подавляет строгие аэробы, включая виды Bacillus и Pseudomonas. Методы выделения L. monocytogenes зависят от исследуемого материала. Обычно исследуемый образец сначала вносят в обогатительный бульон для размножения микроорганизмов, после чего выполняют выделение и идентификацию. В зависимости от типа образца следует выбирать соответствующие методику и селективный обогатительный бульон.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор красного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция

Реакция 4,74 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективного супплемента для листерий PALCAM (FD061) и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Условия хранения и срок годности

• Храните основу в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Из-за вариаций питательных потребностей некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Меры предосторожности

• Продукт предназначен для диагностики in vitro.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• С препаратом должны работать только обученные сотрудники.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

В отличие от неспецифических обогатительных бульонов, бульон PALCAM сочетает селективное подавление сопутствующей микрофлоры хлоридом лития и супплементом FD061 с дифференциацией по гидролизу эскулина и ферментации маннитола.

Производитель

HiMedia Laboratories Limited, Индия.