HiMedia M1090-100G Основа бульона для идентификации листерий

Основа бульона для идентификации листерий HiMedia M1090-100G (PALCAM) для селективного обогащения и идентификации видов Listeria из клинических и неклинических образцов. Применяется для выделения Listeria monocytogenes из проб крови, пищевых и молочных продуктов; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Бульон для идентификации листерий, также известный как PALCAM (Polymyxin-Acriflavin-Lithium chloride-Ceftazidime-Aesculin-Mannitol), предназначен для селективного обогащения культур Listeria.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Высокая концентрация хлорида лития в сочетании с селективной добавкой FD061 (содержащей полимиксин B, акрифлавина гидрохлорид и цефтазидим) подавляет рост сопутствующей микрофлоры. Соевый лецитин обладает свойствами, аналогичными желтку яйца, что исключает необходимость дополнительного внесения эмульсии желтка.

Дифференциация основана на следующих реакциях:

• Гидролиз эскулина: L. monocytogenes гидролизует эскулин, что приводит к образованию чёрного окрашивания среды (взаимодействие с цитратом аммония и железа).
• Ферментация маннита: L. monocytogenes не ферментирует маннит. Контаминанты, такие как энтерококки и стафилококки, ферментируют маннит, вызывая изменение цвета среды с красного на жёлтый благодаря индикатору феноловому красному.

Инкубация в микроаэрофильных условиях позволяет подавить рост строгих аэробов, таких как виды Bacillus и Pseudomonas.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 23,69 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить стерильное содержимое 1 флакона селективной добавки для листерий (PALCAM) (FD061).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа

1. Инокулировать исследуемый образец в подготовленный бульон.
2. Инкубировать при температуре 30 °C в течение 24–48 часов.
3. После инкубации произвести пересев примерно 0,1 мл бульона на селективные агары для листерий, такие как Listeria Identification Agar (PALCAM) (M1064) или Listeria Oxford Agar (M1145).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки Listeria Selective Supplement (PALCAM) (FD061) после инкубации при 30 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и работа с образцами

Типы образцов

• Клинические образцы: кровь.
• Пищевые и молочные продукты.
• Образцы воды (согласно местным стандартам и руководствам).

Ограничения и предостережения

• Из-за вариаций в питательных свойствах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Среда предназначена только для диагностики in vitro.
• Работа должна проводиться квалифицированным персоналом с использованием средств индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица).
• Использованные материалы подлежат обязательной стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.