Основа бульона вторичного обогащения для листерий HiMedia M1083

Основа бульона вторичного обогащения для листерий HiMedia M1083 — элективная питательная среда для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и объектов внешней среды. Среда обеспечивает оптимальные условия роста листерий и позволяет идентифицировать их по способности гидролизовать эскулин.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон вторичного обогащения Фрейзера является модификацией среды UVM Secondary Enrichment Broth (разработка USDA-FSIS), основанной на формуле Фрейзера и Спербера. Среда рекомендована APHA для высокоточного обнаружения видов Listeria в пищевых и экологических пробах.

Механизм работы

• Питательная поддержка: Протеозо-пептон, триптон, экстракт дрожжей и пептон HM B обеспечивают высокую питательную ценность, предоставляя необходимые углеродные и азотистые соединения.
• Буферизация: Фосфаты поддерживают стабильность pH среды.
• Индикация: Все виды Listeria обладают $\beta$-глюкозидазной активностью. Они гидролизуют эскулин (замещенный глюкозид) до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония-железа(III), образуя комплекс 6,7-дигидроксикумарина чёрно-коричневого цвета.
• Селективность: Высокая концентрация хлорида натрия и добавление хлорида лития подавляют рост энтерококков, которые также способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры подавляется при добавлении селективных добавок (налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина).

Состав

Состав, г/л:

Значение pH при 25 °C: 7,2 $\pm$ 0,2.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 57,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона обогатительной добавки Фрейзера (FD065) или селективной добавки Фрейзера (FD125).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа пищевых продуктов и проб из окружающей среды.

• Пищевые образцы: обработка проводится согласно установленным руководствам.
• Экологические образцы: сбор и обработка проб осуществляются в соответствии с действующими методиками.
• Ограничения: для окончательной идентификации штаммов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: жёлтый прозрачный раствор с небольшим осадком.
  • После добавления FD065 или FD125: флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор с небольшим осадком.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (для 5,78 % водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании добавок FD065 или FD125 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от перепадов температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.

Комплект поставки и совместимость

Поставляется как основа среды. По заявке доступны следующие добавки:

• FD065 Fraser Enrichment Supplement / Обогатительная добавка Фрейзера
• FD064 Fraser Listeria Supplement / Добавка Фрейзера для листерий
• FD125 Fraser Selective Supplement / Селективная добавка Фрейзера