Основа бульона вторичного обогащения для листерий HiMedia M1083

Порошковая селективная питательная среда «Основа бульона вторичного обогащения для листерий HiMedia M1083» предназначена для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и объектов внешней среды; конечный pH среды составляет 7,2 ± 0,2. Среда применяется при анализе пищевых и экологических образцов, а для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение и область применения

Основа бульона вторичного обогащения для листерий HiMedia M1083 предназначена для приготовления среды, используемой для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из:

• пищевых образцов;
• образцов объектов внешней среды.

Среда является модификацией бульона вторичного обогащения UVM, разработанного Службой безопасности и инспекции пищевых продуктов Министерства сельского хозяйства США (USDA-FSIS), и основана на рецептуре Fraser и Sperber. Рецептура сформулирована для создания условий, оптимальных для роста видов Listeria.

Состав

Содержание компонентов указано в граммах на литр.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 5,78 % масс./об.

Принцип действия и интерпретация

Протеозный пептон, триптон, дрожжевой экстракт и пептон HM B повышают питательность среды, обеспечивая микроорганизмы необходимыми углеродсодержащими и азотсодержащими веществами. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.

Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, которая проявляется почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый глюкозид — с образованием глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа, содержащимися в цитрате аммония железа, с образованием чёрно-коричневого комплекса 6,7-дигидроксикумарина. Цитрат аммония железа также способствует росту L. monocytogenes.

Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, способные гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры в значительной степени подавляется налидиксовой кислотой и гидрохлоридом акрифлавина, входящими в состав добавок Fraser.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона обогатительной добавки Fraser FD065 или одного флакона селективной добавки Fraser FD125.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в необходимом объёме.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: селективный
• Назначение: основа
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животного происхождения
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH при контроле качества: 7,00–7,40

Типы образцов и обращение с ними

Пищевые образцы

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими руководствами.

Образцы объектов внешней среды

Для образцов объектов внешней среды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Порошок от кремового до жёлтого цвета, однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.
• После добавления FD065 или FD125: в пробирках образуется флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.

Реакция

Реакцию определяют для 5,78 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления обогатительной добавки Fraser FD065 или селективной добавки Fraser FD125 и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.