HiMedia M1083-500G Основа бульона для вторичного обогащения Фрейзера

Основа бульона для вторичного обогащения Фрейзера HiMedia M1083-500G предназначена для изоляции, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых и environmental-образцов. Среда обеспечивает оптимальные условия роста листерий с использованием индикаторной реакции на гидролиз эскулина.

Принцип измерения

Бульон Фрейзера для вторичного обогащения является модификацией среды UVM (USDA-FSIS) и рекомендован APHA. Принцип работы основан на следующем:

• Питательная поддержка: протеоз-пептон, триптон, экстракт дрожжей и пептон HM B обеспечивают высокую питательность среды, поставляя необходимые углеродистые и азотистые вещества.
• Буферизация: фосфаты поддерживают стабильный уровень pH.
• Селективность: высокая концентрация NaCl и добавление хлорида лития подавляют рост энтерококков. Рост сопутствующей микрофлоры ингибируется при добавлении налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина (в составе добавок FD).
• Индикация: все виды Listeria обладают $\beta$-глюкозидазной активностью. Они гидролизируют эскулин (замещенный глюкозид) до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония-железа(III), образуя черно-коричневый комплекс 6,7-дигидроксикумарина, что проявляется почернением среды. Цитрат аммония-железа(III) также стимулирует рост L. monocytogenes.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. {Suspension}: Растворить 57,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. {Dissolution}: При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. {Sterilization}: Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. {Supplementation}: Охладить среду до 45–50 °C и в асептических условиях добавить содержимое одной ампулы добавки для обогащения Фрейзера (Fraser Enrichment Supplement FD065) или одной ампулы селективной добавки Фрейзера (Fraser Selective Supplement FD125).
5. {Mixing}: Тщательно перемешать и разлить по емкостям.

Работа с образцами

• Пищевые образцы: обработка проводится согласно установленным руководствам по работе с пищевыми пробами.
• Экологические образцы: сбор и обработка осуществляются в соответствии с профильными методиками сбора проб окружающей среды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические и эксплуатационные параметры

• Вес: 500 г
• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Базальная среда: желтый прозрачный раствор с небольшим осадком.
  • После добавления FD065 или FD125: флуоресцентно-желтый прозрачный раствор с небольшим осадком в пробирках.
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПЭНП (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании добавки FD065 или FD125 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.

Ограничения применения

Результаты на данной среде являются предварительными. Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.