HiMedia M1079-100G Основа селенит-цистинового бульона

Сухая питательная среда HiMedia M1079-100G Основа селенит-цистинового бульона для селективного обогащения Salmonella и, возможно, Shigella sonnei из фекалий, мочи, воды и пищевых продуктов; масса упаковки — 100 г. Основа применяется в микробиологических лабораториях для выявления низких концентраций сальмонелл, хранится при 10–30 °C, а приготовленная среда — при 2–8 °C.

Назначение

Основа селенит-цистинового бульона предназначена для приготовления селективной среды обогащения при выявлении Salmonella и, возможно, Shigella sonnei в клинических образцах, воде и пищевых продуктах.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии, моча.
• Образцы воды.
• Пищевые продукты.
• Молочные продукты.

Среда обогащения используется для выявления патогенов в фекальных образцах, где возбудители присутствуют в небольшом количестве на фоне кишечной микрофлоры. Селенит-цистиновый бульон применяют для выявления Salmonella в неострых стадиях заболевания, когда количество микроорганизмов в фекалиях низкое, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения выявляемости небольшого количества микроорганизмов у пациентов без симптомов или в период реконвалесценции.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита было впервые продемонстрировано Клеттом, а Гут использовал селенит для выделения Salmonella Typhi. Лейфсон подробно исследовал свойства селенита и разработал соответствующие питательные среды. Селенит-цистиновая среда представляет собой модификацию формулы Лейфсона с добавлением цистина. Модификации исходного состава и аналогичные среды рекомендованы AOAC, APHA, USP и другими профильными организациями.

Триптон обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза поддерживает pH среды. Селенит восстанавливается в процессе роста бактерий, при этом образуется щёлочь. Повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к избыточному росту других бактерий. Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, поддерживает нейтральный pH. Фосфат натрия стабилизирует pH и дополнительно снижает токсичность селенита. L-цистин улучшает восстановление Salmonella.

После обогащения бульон пересеивают на дифференциально-диагностические плотные среды:

• бисмут-сульфитный агар (M027);
• бриллиантовый зелёный агар (M016);
• агар XLD (M031).

Не инкубируйте бульон дольше 24 ч: ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 19,01 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 4 г гидроселенита натрия (M1079B).
3. Нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Разлейте среду в стерильные пробирки.
5. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке пара в течение 10 мин.
6. Не стерилизуйте автоклавированием. Чрезмерный нагрев ухудшает свойства среды.
7. Утилизируйте приготовленную среду, если произошло значительное восстановление селенита, о чём свидетельствует красный осадок на дне пробирки или флакона.

Вместо M1079B после кипячения в среду можно добавить:

• диски с биселенитом натрия DD056 — 1 диск на 10 мл среды;
• гранулу биселенита натрия DB001 — 1 гранула на 100 мл среды.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно профильным руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и действующим местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления гидроселенита натрия (M1079B), пересеве на агар МакКонки (M081) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет порошка: от кремового до светло-жёлтого.

Состояние: однородный, легко сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет раствора: от кремового до жёлтого.

Прозрачность: прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакцию определяют для 1,9 % масс./об. среды вместе с 0,4 % масс./об. водным раствором селенита при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Физическая форма: порошок.
• Масса: 100 г.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Температура хранения основы: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Ограничения применения

1. Перегрев среды приводит к потере её селективности.
2. Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее выделение культуры и биохимические тесты.
3. Бульон нельзя инкубировать дольше 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.
4. При значительном восстановлении селенита, определяемом по красному осадку на дне пробирки или флакона, приготовленную среду необходимо утилизировать.

Условия хранения и срок годности

• Хранение основы: при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения слёживания вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Безопасность

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.

Техническое отличие состава

В отличие от готовой селенит-цистиновой среды, продукт представляет собой основу без биселенита и требует добавления гидроселенита натрия M1079B либо альтернативных дисков DD056 или гранул DB001 перед приготовлением рабочей среды.