Основа агара Эндо HiMedia M1077-500G (уп/500 гр)
Диагностическая питательная среда Основа агара Эндо HiMedia M1077-500G (уп/500 гр) предназначена для приготовления агара Эндо из расчёта 38 г сухой среды на 1 л воды. Основа используется для подтверждения предположительного теста на лактозоферментирующие колиформные бактерии в клинических, пищевых, молочных и водных образцах; сертификат — ФСЗ 2009/03709.
Описание
Диагностическая питательная среда Основа агара Эндо HiMedia M1077-500G (уп/500 гр) предназначена для приготовления агара Эндо из расчёта 38 г сухой среды на 1 л воды. Основа используется для подтверждения предположительного теста на лактозоферментирующие колиформные бактерии в клинических, пищевых, молочных и водных образцах; сертификат — ФСЗ 2009/03709.
Назначение и область применения
Основа агара Эндо применяется для приготовления питательной среды, используемой для подтверждения обнаружения и количественного определения колиформных бактерий после предположительного теста.
Исследуемые образцы
- Клинические образцы: фекалии, моча.
- Пищевые и молочные образцы.
- Образцы воды.
Среда используется для выявления и выделения колиформных и фекальных колиформных бактерий из питьевой воды, молока, молочных продуктов и пищевых продуктов.
Состав
Для приготовления среды используется следующая формула:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон | 10,000 |
| Лактоза | 10,000 |
| Дикалий фосфат | 3,500 |
| Сульфит натрия | 2,500 |
| Агар | 12,000 |
Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.
Принцип действия и интерпретация
Агар Эндо первоначально разработан как культуральная среда для дифференциации ферментирующих и неферментирующих лактозу микроорганизмов с одновременным подавлением роста грамположительных бактерий. Подавление роста грамположительных микроорганизмов достигается без использования желчных солей: ингибирующее действие обеспечивают сульфит натрия и основной фуксин.
Агар Эндо также известен как фуксин-сульфитный и инфузионный агар. Среда использовалась для выделения возбудителей брюшного тифа и применяется при микробиологическом исследовании воды, сточных вод, молочных и пищевых продуктов.
Пептон обеспечивает микроорганизмы азотом, углеродом, витаминами и минеральными веществами, необходимыми для роста бактерий. Сульфит натрия и основной фуксин оказывают ингибирующее действие на грамположительные микроорганизмы.
Лактозоферментирующие колиформные бактерии образуют альдегид и кислоту. Альдегид высвобождает фуксин из фуксин-сульфитного комплекса, поэтому колонии окрашиваются в красный цвет. Для Escherichia coli эта реакция выражена особенно сильно: фуксин кристаллизуется, придавая колониям стойкий зеленовато-металлический блеск, называемый фуксиновым блеском.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 38 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Добавьте 4 мл 10%-го основного фуксина FD059.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
Сбор, обращение и подготовка образцов
- Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам и локальным стандартам.
- Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
- Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам.
- После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Ограничения и меры предосторожности
- Если затвердевшая культуральная среда имеет чрезмерно красный цвет, для его удаления добавьте несколько капель свежеприготовленного 10%-го раствора сульфита натрия — не более 1 мл на литр — и прокипятите среду.
- Помимо представителей семейства Enterobacteriaceae, на среде могут расти другие грамотрицательные бактерии и дрожжи.
- Не допускайте воздействия света на среду: фотоокисление может привести к снижению её продуктивности.
- Не перегревайте среду, поскольку перегрев может снизить её продуктивность.
- Для подтверждения результатов необходимо провести дополнительные биохимические тесты.
- Изделие предназначено для диагностики in vitro и профессионального использования.
- Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
- При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
- Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
- При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
- Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-м агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- После добавления FD059: среда оранжево-розового цвета.
- После добавления FD059: прозрачный или слегка опалесцирующий гель; в чашках Петри образуется мелкодисперсный осадок.
Реакция и pH
Реакция 3,8%-го водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.
Диапазон pH: 7,30–7,70.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленным основным фуксином FD059 при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии |
|---|---|---|---|---|
| Bacillus subtilis subsp. spizizenii ATCC 6633 (00003*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | |
| Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | розовый |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | 50–100 | от отсутствующего до слабого | ≤10 % | розовый, мелкие колонии |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | от розового до розово-красного, с металлическим блеском |
| Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | розовый, слизистый |
| Proteus vulgaris ATCC 13315 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | от бесцветного до бледно-розового |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | бесцветный, неправильной формы |
| Salmonella Typhi ATCC 6539 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | от бесцветного до бледно-розового |
| Shigella sonnei ATCC 25931 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | от бесцветного до бледно-розового |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | ≥10⁴ | подавлен | 0 % | |
| Enterobacter cloacae ATCC 13047 (00083*) | 50–100 | хороший | 40–50 % | розовый |
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | бесцветный |
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | бесцветный |
| Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥50 % | бесцветный |
* Соответствующие номера WDCM.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia.
- Модель/артикул: M1077-500G.
- Тип питательной среды: диагностическая.
- Назначение изделия: основа питательной среды.
- Физическая форма: порошок.
- Происхождение: животное.
- Тип продукта: стандартный.
- Тип упаковки: полиэтилен высокой плот
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Тип питательной среды
| Тип питательной среды | Диагностический |
|---|
Сертификат
| Сертификат | ФСЗ 2009/03709 |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
