Основа агара Эндо HiMedia M1077-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа агара Эндо HiMedia M1077-500G (уп/500 г) для подтверждения презумптивного теста на колиформы. Применяется для выделения и количественного определения бактерий группы колиформ в клинических образцах, пищевых продуктах, молочной продукции и воде.

Принцип измерения

Среда предназначена для дифференциации бактерий, ферментирующих лактозу, и неферментирующих её, при одновременном подавлении роста грамположительных бактерий. Ингибирование грамположительных микроорганизмов достигается за счёт добавления сульфита натрия и основного фуксина.

Колиформы, ферментирующие лактозу, вырабатывают альдегид и кислоту. Альдегид высвобождает фуксин из комплекса фуксин-сульфит, что приводит к окрашиванию колоний в красный цвет. В случае с Escherichia coli эта реакция выражена наиболее ярко: фуксин кристаллизуется, придавая колониям характерный постоянный зеленоватый металлический блеск (фуксиновый блеск).

Область применения

Среда рекомендуется APHA для микробиологического анализа следующих объектов:

• Питьевая вода и сточные воды (подтверждение и подсчёт колиформных бактерий после презумптивного теста).
• Молочные продукты и продукты питания (выделение колиформ и фекальных колиформ).
• Клинические образцы: моча, фекалии.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 4 мл 10 % раствора основного фуксина (FD059).
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 lbs pressure) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

• Вода: сбор и обработка осуществляются согласно местным стандартам и руководствам APHA.
• Пищевые и молочные продукты: сбор и обработка согласно установленным методикам анализа продуктов питания.
• Клинические образцы: обработка в соответствии с установленными протоколами работы с биоматериалом.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,5 $\pm$ 0,2.

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободный порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность: после добавления основного фуксина (FD059) — оранжево-розовый цвет; в чашках Петри — от прозрачного до слегка опалесцирующего гель с мелким осадком.
• Реакция: pH 3,8 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 7,5 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении основного фуксина (FD059) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения и предостережения

1. Если готовая среда имеет слишком интенсивный красный цвет, добавьте несколько капель (макс. 1 мл/л) свежеприготовленного 10 % раствора сульфита натрия и прокипятите.
2. Помимо семейства Enterobacteriaceae, могут расти другие грамотрицательные бактерии и дрожжи.
3. Избегайте воздействия света на среду во избежание фотоокисления и снижения продуктивности.
4. Избегайте перегрева среды, так как это может привести к потере её свойств.
5. Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с установленными лабораторными правилами утилизации инфекционных материалов.