HiMedia M1077-100G Основа агара Эндо

Основа сухой питательной среды HiMedia M1077-100G агар Эндо для подтверждения предварительных тестов на колиформные бактерии, ферментирующие лактозу. Применяется для выделения и количественного определения колиформ и фекальных колиформ в воде, молочных продуктах и пищевых товарах; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда агар Эндо предназначена для дифференциации бактерий, ферментирующих лактозу, и неферментирующих её, при одновременном подавлении роста грамположительных микроорганизмов. Подавление грамположительной флоры достигается за счёт добавления сульфита натрия и основного фуксина (без использования желчных солей).

Механизм дифференциации:

• Колиформные бактерии, ферментирующие лактозу, вырабатывают альдегиды и кислоты.
• Альдегиды высвобождают фуксин из комплекса фуксин-сульфит, что приводит к окрашиванию колоний в красный цвет.
• При росте Escherichia coli реакция выражена особенно сильно: фуксин кристаллизуется, придавая колониям характерный постоянный зеленоватый металлический блеск (фуксиновый блеск).

Пептон в составе среды обеспечивает азот, углерод, витамины и минералы, необходимые для роста бактерий.

Область применения

Среда рекомендуется APHA для микробиологического анализа следующих объектов:

• Вода и сточные воды (подтверждение и подсчёт колиформных бактерий после предварительного теста).
• Молочные продукты и пищевые товары (выделение и идентификация колиформ и фекальных колиформ).
• Клинические образцы: моча, фекалии.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 38 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 4 мл 10 % раствора основного фуксина (FD059).
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед розливом в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

• Вода: сбор и обработка согласно местным стандартам и руководствам.
• Пищевые и молочные продукты: согласно установленным методикам сбора и подготовки проб.
• Клинические образцы: обработка в соответствии с утвержденными протоколами.
• После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,5 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность: после добавления FD059 — оранжево-розовый цвет; прозрачный или слегка опалесцирующий гель с мелким осадком в чашках Петри.
• Реакция: pH 3,8 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 7,5 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением основного фуксина (FD059) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения и предостережения

• Коррекция цвета: если застывшая среда имеет слишком интенсивный красный цвет, добавьте несколько капель (макс. 1 мл/л) свежеприготовленного 10 % раствора сульфита натрия и прокипятите.
• Специфичность: помимо семейства Enterobacteriaceae, могут расти другие грамотрицательные бактерии и дрожжи.
• Светочувствительность: избегайте воздействия света, так как это может привести к фотоокислению и снижению продуктивности среды.
• Температурный режим: избегайте перегрева среды, чтобы не разрушить её питательные свойства.
• Подтверждение: для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.